انتقال سازه ژن درمانی توسط نانوذرات پلی پلکسی (نوع پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده) به سلول های سرطانی روده بزرگ

فاطمه رهبری زاده، fatemeh rahbarizadeh department of medical biotechnology, faculty of medical sciences, tarbiat modares universityگروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس نگار اصل رسولی، negar asle rasouli department of medical biotechnology, faculty of medical sciences, tarbiat modares universityگروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس فرنوش جعفری ایری سفلی، farnoush jafari iri sofla department of medical biotechnology, faculty of medical sciences, tarbiat modares universityگروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس داود احمدوند، davoud ahmadvand school of allied medical sciences, tehran university of medical sciencesدانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران

چکیده

مقدمه و هدف: هدف از این تحقیق، تهیه نانوذرات پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده بانانوبادی ضد tag-72 برای انتقال سازه کدکننده ژن کشنده t-bid به سلول­های سرطان روده بزرگ (کولون) انسانی است. مواد و روش ها: ابتدا نانوبادی نوترکیب تخلیص­شده با sds-page، وسترن بلاتینگ و الایزا تأیید­شد. پلی اتیلن گلیکول روی نانوذرات پلی اتیلن ایمین (pei) سوار شد و درنهایت با اتصال کووالان نانوبادی بر سطح نانوذرات، ناقل پلی پلکسی هدفمند ساخته­شد. بار سطحی و اندازه نانوذرات با استفاده از دستگاه مالورن و دستگاه نانو سایت بررسی و کارایی حامل ژنی ساخته­شده در انتقال ژن کشنده به رده های سلولی آدنوکارسینومای روده بزرگ با آزمون real time pcr بررسی­شد. نتایج: نتایج دستگاه مالورن، ساخت نانوذرات هدفمند با اندازه ۱۶۸ نانومتر و پتانسیل سطحی 7،18+ میلی ولت را نشان­داد. با استفاده از آزمون تاخیر حرکت در ژل، در برگیری و فشرده­سازی صحیح و مناسب سازه ژنی را تأییدکردیم. نتایج real time pcr هدایت بیان ژن هدف به سلول­های توموری روده بزرگ را تأییدکردند. نتیجه گیری: نتایج این تحقیق، کارایی نانوذرات پلی پلکسی هدفمندشده با نانوبادی در انتقال ژن و قابلیت آنها برای هدفمند سازی انتقال ژن به سلول را تأییدمی­کند.