مقاله

تشخیص سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس با استفاده از روش اسپولیگوتایپینگ در بیماران مراجعه کننده به بیمارستان مسیح دانشوری

چکیده

چکیده زمینه و هدف: هدف از این مقاله شناسایی و تمایز الگوی ژنتیکی سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس بیماران مسلول با استفاده از پلی مرفیسمdr(direct repeat) با روش اسپولیگوتایپینگ می باشد. روش بررسی: کشت مثبت متلعق به 238 بیمارمبتلا به سل ریوی از نظر اسپولیگوتایپینگ مورد بررسی قرار گرفت. جداسازی اولیه ی سویه های مایکوباکتریوم باروش پتروف 4 درصد و با استفاده از محیط جنسون lowenstein jensen (lj) انجام شد و برای شناسایی سویه ها از آزمایشات بیوشیمیایی از قبیل، نیاسین، فعالیت کاتالاز، احیای نیترات استفاده شد. حساسیت دارویی در برابر ایزونیازید (2/0 میکروگرم در میلی لیتر)، ریفامپین (40 میکروگرم در میلی لیتر ، استرپتومایسین (10 میکروگرم در میلی لیتر) و اتامبوتول (2میکروگرم در میلی لیتر) به روش تناسبی انجام و سویه ها به سه گروه حساس، mdr و غیر mdr تقسیم بندی شدند. سپس dna از کلنی های مثبت با روش ctab استخراج گردید. قطعات مورد نظر با روش pcr تکثیر شده و پس از دناتوره کردن قطعه ی تکثیر شده، عمل هیبریداسیون با آنزیم استرپتاویدین پر اکسیداز به روشline reverse blot صورت گرفت. با اضافه کردن مقداری لومینسانس و قرار دادن غشاء بر روی فیلم x-ray ، رادیوگرافی انجام گردید.. یافته ها: سویه ها به 9 دسته (,cas1,cas2 beijing , haarlem , u , t1,t2 , eai2 eai3 ) متمایز شدند، که بیشترین تعداد مربوط به سویه ی haarlem (27 درصد، 238/66) و cas1 (25 درصد، 238/60) می باشد. همچنین با این روش دو سویه ی متعلق به مایکوباکتریوم بویس شناسایی شد. نتیجه گیری: این روش سریع، ساده و دارای حساسیت بالا برای تمایز سویه های مایکوباکتریوم توبرکوزیس و مطالعات اپیدمیولوژی می باشد.

اسناد مشابه