مقاله

بررسی حساسیت روش real-time pcr برای تشخیص ویروس بیماری نیوکاسل

سمیه ستاری، دانشجوی کارشناسی ارشد ژنتیک و اصلاح نژاد دام، دانشکده کشاورزی، دانشگاه رازی کرمانشاه محمدحسین بناءبازی، عضو هیات علمی، بخش پژوهشهای بیوتکنولوژی، موسسه تحقیقات علوم دامی کشور، کرج شیدا ورکوهی، عضو هیات علمی، گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه رازی کرمانشاه میثم طباطبایی، عضو هیات علمی، تیم تحقیقاتی نانو سیستم ها , پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، کرج

چکیده

بیماری نیوکاسل یکی از مخرب ترین بیماری های ویروسی طیور در سرتاسر جهان است. باتوجه به اینکه روش های سنتی قابلیت محدودی در کنترل این بیماری دارند، هدف از انجام این مطالعه استفاده از تکنولوژی های نوین برای تشخیص به موقع بیماری جهت کاهش خسارت پیش روی صنعت طیور می باشد. در این مطالعه به منظور تشخیص ویروس نیوکاسل، یک روش real-time-pcr بهینه سازی گردید. استخراج rna با استفاده از کیت rnease mini (شرکت کیاژن، آمریکا) و بر اساس دستورالعمل شرکت سازنده استخراج شد. rna استخراج شده با 109×23/68 رونوشت اولیه به صورت سری رقت های μl 100 برای انجام واکنش real-time pcr تهیه شد. در این آزمایش از سویه b1 واکسن ویروس استفاده شد. آزمایش real-time-pcr با استفاده از کیت تجاری ساخت شرکت genekam biotechnology کشور آلمان انجام شد. حساسیت واکنش real-time pcr با توجه به سری رقت های تهیه شده 34-10×1 رونوشت/میکرولیتر تعیین گردید. با توجه به اینکه سرعت و دقت تشخیص ویروس نیوکاسل در همه گیری ها، نقش مهمی در کنترل بیماری دارد. استفاده از این روش به عنوان یک روش تشخیصی با حساسیت بالا توصیه می گردد.

اسناد مشابه