شناسایی جنسیت جنین انسان از طریق پلاسمای مادر باردار از هفته هشتم به بعد بوسیله nested-pcr

مهرداد هاشمی، mehrdad hashemi assistant professor, department of molecular genetics, islamic azad university, science and research campus, tehran, iran علی ناظمی، ali nazemi phd of molecular genetics, faculty of basic sciences, islamic azad university, tonekabon unit, tonekabon, iran محبوبه صفوی، mahboubeh safavi assistant professor, phd of management of health services, islamic azad university, tehran medical unit, tehran, iran شهلا چایچیان، shahla chaichian assistant professor, department of gynecology and obstetrics, islamic azad university, tehran medical unit, tehran, iran مسعود قانع، masoud ghane assistant professor, phd of biology, faculty of basic sciences, islamic azad university, tonekabon unit, tonekabon, iran شهرآشوب شریفی، shahrashoob sharifi bsc, department of molecular biology, medical laboratory of tonekabon

چکیده

سابقه و هدف: تشخیص پیش از تولد(prenatal diagnosis) جنسیت جنین، نیازمند روش های تهاجمی نظیر نمونه گیری از طریق آمنیوسنتز و نمونه گیری از پرزهای کوریونی(cvs) می باشد. در سال های اخیر، یکی از روشهای غیر تهاجمی بررسی حضور dna سلولهای هسته دار جنینی در پلاسمای خون مادر است که در این تحقیق مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، سیستم nested-pcr برای تشخیص ژن sry جنینی با بکارگیری dna جنینی از پلاسمای خون مادر باردار طراحی و بهینه سازی گردید. نمونه های خونی 32 زن باردار در هفته های 13-8 آبستنی جمع آوری و سپس dna سلولها به روش فنل/کلرفرم استخراج گردید. در سیستم nested-pcr، ژن sry با دو جفت پرایمر طراحی شده تکثیر شد. حضور توالی های کروموزوم y در پلاسمای خون مادر نشان دهنده جنسیت پسر جنین و در صورت فقدان آن نشان دهنده جنسیت دختر بود. یافته ها: از 32 زن باردار، پس از تکثیر ژن sry به روش nested-pcr، در 14مورد نتیجه مثبت بود، بطوری که در18 زن دارای جنین دختر نتایج مثبت دیده نشد و نتایج به دست آمده حساسیت 5/87 درصد را نشان داد. نتیجه گیری: روش استخراج فنل/کلرفرم یک روش ساده و موثر برای جداسازی dna جنین از پلاسمای خون مادر می باشد و روش nested-pcr روشی غیر تهاجمی ارزان و دردسترس برای برای تشخیص پیش از تولد می باشد .