کلونینگ و بیان ترشحی ژن آنزیم لیپاز باسیلوس پومیلوسf۳ بومی ایران در باکتری باسیلوس سوبتیلیس و مقایسه میزان بیان آن نسبت به فرم طبیعی آنزیم

اکبر حیدری، akbar heydari department of microbiology, faculty of biological sciences, shahid beheshti university, tehran, iran.گروه میکروب شناسی – دانشکده علوم زیستی – دانشگاه شهید بهشتی - تهران – ایران مهرداد موسی زاده مقدم، mehrdad moosazadeh moghaddam applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی- دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران – ایران. حسین آقا ملایی، hossein aghamollaei applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی- دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران – ایران محمد باقر یخچالی، mohammad bagher yakhchali department of industrial and environmental biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology, tehran, iranپژوهشکده بیوتکنولوژی صنعتی و محیطی – پژوهشگاه ملی ژنتیک – تهران - ایران بیژن بمبئی، bijan bambaee department of industrial and environmental biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology, tehran, iranپژوهشکده بیوتکنولوژی صنعتی و محیطی – پژوهشگاه ملی ژنتیک – تهران – ایران علی محمد لطیفی، ali mohammad latifi applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی- دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران – ایران محمد هیئت

چکیده

سابقه و هدف : لیپازها بیوکاتالیست های ارزشمندی هستند که به علت کاتالیز نمودن واکنش های شیمیایی مانند آبکافت، کافت الکلی، کافت اسیدی و استرفیکاسیون در صنعت دارای کاربردهای فراوانی می باشند. لیپازهای میکروبی از مهمترین انواع این آنزیم ها هستند که به علت پایداری بالا در حلال های آلی، توانایی کاتالیز ملایم واکنش های هیدرولازی، سهولت در تولید و هزینه های نسبتا پایین آن یکی از مهمترین منابع تولید در صنعت محسوب می گردند. باکتری باسیلوس پومیلوس یکی از مهمترین منابع میکروبی این آنزیم می باشد، اما بیان و ترشح پایین این لیپاز یکی از مهمترین مشکلات پیش رو جهت تولید آن توسط این باکتری محسوب می شود. هدف از این تحقیق تولید نوترکیب آنزیم لیپاز سویه بومی باسیلوس پومیلوس بصورت ترشحی به منظور افزایش سطح بیان آن در باکتری باسیلوس سوبتیلیس می باشد. مواد و روش ها : ژن تولید کننده آنزیم لیپاز این سوش با استفاده از مهندسی ژنتیک در پلاسمید pwb980 همسانه سازی شد و پس از آن به سوش باسیلوس سوبتیلیس wb600 به عنوان میزبان منتقل گردید. در ادامه سطح بیان و ترشح آنزیم به صورت طبیعی و نوترکیب بررسی و مقایسه گردید. یافته ها: آنزیم لیپاز در باسیلوس سوبتیلیس بصورت ترشحی بیان شد. میزان بیان این آنزیم نسبت به سوش طبیعی بیشتر می باشد. نتیجه گیری : تولیدنوترکیب لیپاز باسیلوس پومیلوس در باکتری باسیلوس سوبتیلیس روش مناسبی برای افزایش میزان بیان این آنزیم می باشد.