کلونینگ و بیان قطعه ای از ژن نوکلئوپروتئین ویروس هاری در اشریشیا کولای و ارزیابی آنتی ژنیسیتی محصول بیان

k. tursunov، department of immunochemistry and immunobiotechnology, national center for biotechnology, astana 010000, kazakhstan a. begaliyeva، department of immunochemistry and immunobiotechnology, national center for biotechnology, astana 010000, kazakhstan b. ingirbay، department of immunochemistry and immunobiotechnology, national center for biotechnology, astana 010000, kazakhstan k. mukanov، department of immunochemistry and immunobiotechnology, national center for biotechnology, astana 010000, kazakhstan e. ramanculov، national center for biotechnology, astana 010000, kazakhstan a. shustov، department of genetic engineering, national center for biotechnology, astana 010000, kazakhstan k. mukantayev

چکیده

نوکلئوپروتئین ویروس هاری (پروتئین n) rna ژنومی ویروس را در کپسید محصور کرده و کمپلکس ریبونوکلئوپروتین ویروسی را تشکیل می دهد. این نوکلئوپروتیئن ها ساختارهای بسیار سازمان یافته ای هستند که تکثیر سلول های b و تولید آنتی بادی های ضد پروتئین n را فعال می کنند. علاوه بر سلول b، نوکلئوپروتئین ویروس هاری نشان داده شده است که پاسخ های قوی سلول t کمکی را القا می کند که منجر به یک پاسخ ایمنی هومورال طولانی مدت و قوی می شود. پروتئین n ویروس هاری یک هدف مولکولی انتخابی برای توسعه ابزار تشخیص عفونت حاد هاری است. ما یک قطعه c-terminal نوترکیب واکنشی ایمنی از پروتئین n ویروس هاری تولید کردیم که دارای یک شاخص آنتی ژنیکی واقع در بین موقعیت های 360 تا 390 است. ژن سنتزی کد کننده پروتئین n به منظور تولید آنتی ژن نوترکیب در سلول های bl21 (de3) باکتری اشریشیا کولای درون یک پلاسمید بیان کلون شد. sds-page حضور یک محصول با وزن مولکولی مورد انتظار (kda 44) را نشان داد. قطعه نوترکیب پروتئین n به طور موثر آنتی بادی های موجود در سرم های موش های ایمن شده با یک ویروس غیر فعال شده هاری را شناسایی کرد. بنابراین، آنتی ژن نوترکیب تولید شده از نوکلئوپروتئین ویروس هاری می تواند در سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم برای تشخیص عفونت هاری مورد استفاده قرار گیرد.