تولید آنزیم l-آسپاراژیناز خارج سلولی توسط سویه نمک دوست، vibrio sp.
چکیده
مقدمه: l-آسپاراژیناز داروی ضدسرطان است که در شیمی درمانی لوسمی لنفوسیتی استفاده می شود. امروزه این آنزیم از منابع باکتریایی مشتق شده و اکثراً l-آسپاراژیناز ii escherichia coli و به میزان کمتر l-آسپاراژیناز erwinia sp. استفاده پزشکی دارد. به دلیل ایجاد واکنش های افزایش حساسیت، پیداکردن و استفاده از آنزیم های جدید l- آسپاراژیناز امروزه درخور توجه است. با توجه به شناخت کمتر باکتری های نمک دوست غربال گری این آنزیم در این گروه از باکتری ها می تواند نتایج مفیدی را به همراه داشته باشد. مواد و روشها: در این مطالعه، آنزیم l-آسپاراژیناز در 130 باکتری نمک دوست و تحمل کننده نمک دریافت شده از مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران با استفاده از معرف فنل رد غربال شدند. سپس برای سویه منتخب منحنی رشد، سنجش آنزیمی انجام شد و نهایتاً اثر فاکتورهای مختلف بر تولید و فعالیت آنزیم ها بررسی شد. نتایج: براساس نتایج به دست آمده 40 سویه مولد این آنزیم به دست آمد. بیشترین فراوانی جنس باکتریایی تولیدکننده l-آسپاراژیناز، متعلق به جنس halomonas و marinobacter بودند که هریک 4/21درصد از کل را به خود اختصاص دادند. در میان سویه های تولیدکننده، بیشترین میزان تولید متعلق به سویه gbpx3 بود که براساس آنالیز s rrna16 متعلق به جنس vibrio بود. شرایط محیط کشت بهینه برای تولید آنزیم در دمای 35 درجه سانتی گراد (65/0 iu/ml)، ph 8 (926/0iu/ml) و 5/2درصد nacl (903/0 iu/ml) به دست آمد و بیشترین میزان فعالیت آنزیم در دمای 35 درجه سانتی گراد (781/0 iu/ml)، ph 8 (82/0 iu/ml) و نبود nacl (806/0 iu/ml) تعیین شد. بحث و نتیجهگیری: این پروژه با هدف غربال گری باکتری های نمک دوست و تحمل کننده نمک جداشده از مناطق شور ایران که تولیدکننده آنزیم l-آسپاراژیناز هستند، انجام شده است. از میان سویه های مثبت به دست آمده، سویه منتخب gbpx3 از جنس vibrio به عنوان سویه منتخب در تولید آنزیم انتخاب شد که ممکن است دارای l-آسپاراژیناز با اثرات جانبی کمتر برای بیماران باشد.