جداسازی و شناسایی مولکولی باکتریهای استرپتومایسس مولد آنزیم کیتیناز و بررسی آثار آنتاگونیستی آنها در شرایط آزمایشگاهی
چکیده
مقدمه: به منظور کاهش استفاده از قارچکشهای شیمیایی در کنترل بیماریهای گیاهی، رویکرد جایگزین کنترل بیماریها به روش کنترل زیستی، مورد توجه قرار گرفته شده است. بیشتر اکتینومیستها، به ویژه گونه های streptomyces، عوامل کنترل زیستی با طیف گسترده در برابر پاتوژنهای قارچی گیاهان هستند. هدف از انجام این پژوهش، استفاده از اکتینومیستهای کیتینولایتیک جدا شده از خاکهای استان آذربایجانشرقی برای تولید سموم زیستی است. مواد و روشها: نمونههای خاک از مناطق مختلف استان آذربایجانشرقی تهیه شد. با توجه به ویژگیهای ریختشناسی گونه های streptomyces، تک کلونیها جداسازی شد. برای شناسایی مولکولی، ابتدا dna باکتریایی استخراج و سپس، توالی 16s rdna آنها تکثیر شد. با استفاده از آغازگرهای جهانی، جدایههای دارای ژن کیتیناز غربالگری شد. جدایههای مولد آنزیم کیتیناز با قارچهای پاتوژن جنس آلترناریا کشت آنتاگونیستی داده شد. نتایج: از 60 نمونه خاک جمعآوری شده، 31 جدایه باکتری استرپتومایسس جداسازی شد. از این تعداد، 4 جدایه به گزینش جدایه های مولد آنزیم کیتیناز نتیجه مثبت نشان دادند. کشت آنتاگونیستی، 3 جدایه منتخب باکتری با دو قارچ پاتوژن، نشان داد که جدایه ae09 دارای بیشترین اثر ضد قارچی است. بحث و نتیجهگیری: خاکهای استان آذربایجانشرقی واجد باکتریهای استرپتومایسس مولد ترکیبات ضدقارچی هستند. دست یابی به باکتری های استرپتومایسس دارای ژن کد کننده کیتیناز می تواند به شناسایی سویه های بسیار مؤثر برای دفاع ضد قارچی منجر باشد.