مقاله

انتقال ژن آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت bبه گیاه توتون

چکیده

یکی از شایع­ترین آلودگی­های ویروسی انسانی در سراسر جهان آلودگی ویروس هپاتیت bاست. مؤثرترین شیوه برای کنترل و درمان این بیماری، تزریق واکسن می­باشد، اما با توجه به گران بودن داروهای شیمیایی، تولید پروتئین نوترکیب ویروس هپاتیت b به عنوان واکسن خوراکی در گیاهان طی چند سال گذشته با بیورآکتور­های مناسب برای تولید ارزان و فراوان اهمیت یافته است. بنابراین در این پژوهش سعی شده است که ژن hbsag با کمترین هزینه به گیاه مدل توتون منتقل شود. بدین­منظور ابتدا ناقل دوگانهpcambia 1304 حاوی ژن hbsag در باکتری escherichia coli سویهjm107 و اگروباکتریوم سویه lba4404 کلون و به روش قطعات برگی به گیاه توتون منتقل شد. باززایی ریزنمونه­های تلقیح شده در محیط­کشت انتخابی ms حاوی 500 میلی­گرم در لیتر سفوتاکسیم و 15 میلی­گرم در لیتر هیگرومایسین و همچنین تنظیم­کننده­های رشد در غلظت­های یک میلی­گرم در لیتر bap و یک دهم میلی­گرم در لیتر naa انجام گرفت. در آخر پس از رسیدن گیاهچه­های غربال شده به ارتفاع 15 سانتیمتر، به روش ctab از گیاهان تراریخته احتمالی dna استخراج شد و جهت شناسایی و تأیید حضور ژن با آغازگرهای اختصاصی واکنش pcr و جهت بررسی بیان ژن واکنش rt-pcr انجام گرفت و بدین ترتیب حضور و بیان این ژن در گیاهان تراریخته توتون تأیید شد

اسناد مشابه