تولید و ارزیابی رده سلولی اپیتلیالی شکل از بافت باله ماهی آزاد دریای خزر (salmo trutta caspius)
چکیده
امروزه کشت سلول ابزار بسیار مفیدی برای پاسخ به بسیاری از سؤالات در زمینهی زیست شناسی محسوب میشود و کاربرد ردههای سلولی روز به روز در حال افزایش است. در این مطالعه تولید کشت اولیه و cell line ماهی آزاد دریای خزر (salmo trutta caspius) مورد بررسی قرار گرفت و دو روش کشت اولیه explant و روش جداسازی آنزیمی به کمک آنزیم تریپسین به منظور تولید کشت اولیه استفاده شد. مهاجرت سلول از باله های سینهای، پشتی، دمی و مخرجی در روش explant با یکدیگر مقایسه شد. تاثیر مدت زمانهای مختلف تماس با تریپسین بر روی سلولها با یکدیگر مقایسه شد. محیط کشت leibovitz’s l-15 به همراه %20 fbs و %1 pen-strep استفاده شد. به منظور ارزیابی رده تولید شده، از سلولها کاریوتیپ تهیه شد و در نهایت این سلولها با کمک dmso فریز شدند و به دمای c˚196- منتقل شدند. محاسبات کارایی کشت بافت نشان داد که باله سینهای با میانگین %31/71 بهترین باله به منظور تولید رده سلولی از این ماهی است. در مقایسه کلی بین روشهای کشت اولیه، در روش جداسازی آنزیمی با آنزیم تریپسین نسبت به روش explant، سلولهای زنده بیش تری حاصل شد. عدد کروموزومی سلولها 80=n2 بود و درصد زندهمانی بعد از گذشت یک ماه در ازت مایع %4/84 بود . با توجه به اینکه این سلولها تا 22 نوبت پاساژ و انجماد و ذوب متوالی، از قابلیت رشد خوبی برخوردار بودهاند، از آن ها می توان در مطالعات مختلف استفاده کرد. این سلولها به عنوان اولین رده سلولی cell strain) ) از آبزیان تولید شده در کشور در بانک سلول های جانوری مرکز ذخائر ژنتیکی و زیستی ایران (ibrc) با کدهای cs2-1، cs2-2 و cse و شماره دستیابی 3-ibrc c10190 نگهداری می شود.