تولید رده های جدید سلولهای بنیادی جنینی از موش نژاد balb/c
چکیده
سلولهای بنیادی جنینی (es)، سلولهایی پرتوان و با قابلیت نوسازی هستند. این سلولها از توده سلولی داخلی بلاستوسیستها به دست می آیند. تحت شرایط خاص می توان این سلولها را در جهت خاصی در محیط آزمایشگاهی متمایز کرد. حتی با دستکاری ژنتیکی آنها می توان موشهای ترانس ژن و یا موشهایی که یک ژن آنها از کار افتاده است (knockout) ایجاد کرد. به دلیل اهمیت فراوان سلولهای es، این مطالعه برای تولید رده های جدیدی از موش انجام شد. بدین منظور، بلاستوسیستهای 5/3 روزه از موشهای نژاد balb/cبدست آمدند و روی فیبروبلاستهای جنین های موشی در محیط es حاوی iu/ml1000 و iu/ml5000 فاکتور ممانعت کننده لوکمیایی (lif) کشت شدند. رده های حاصل از نظر کاریوتیپ ساده ، نواربندی c، واکنش زنجیره ای پـــــلی مراز ژن تــــــعیین کننده بیضه (sry-pcr)، آلکالین فسفاتاز و بیان فاکتور رونویسی oct-4 با استفاده از rt-pcr مورد ارزیابی قرار گرفتند. بدین روش سه رده سلولی با مشخصات مورفولوژیکی سلولهای es در غلظت iu/ml 5000 از فاکتورlif به دست آمد. سه رده حاصل نر بودند. اما مشخصات کاریوتیپ آنها نشان داد که دو رده دارای کاریوتیپ طبیعی و دیپلویید هستند و یک رده تتراپلویید می باشد. هر سه رده ، آلکالین فسفاتاز و oct-4 را بیان می کردند. نتایج مذکور نشان داد که دو رده سلولی نر از نژاد balb/c با مشخصات سلولهای es (مورفولوژی ، کاریوتیپ طبیعی همراه با فعالیت آلکالین فسفاتاز و (oct-4 بدست آمد.