مقاله

بهینه سازی بیان سم شقایق دریایی (فراگاسیاتوکسین c) در باکتری e.coli سویه bl۲۱

بابک عبدی، babak abdi msc student in biochemistry, department of biology, faculty of science, urmia university, urmia, iran رشید جامعی، rashid jamei associate professor, department of biology, faculty of science, urmia university, urmia, iranدانشیار بیوشیمی، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران مهدی ایمانی، mehdi imani assistant professor, department of basic sciences, faculty of veterinary medicine, urmia university, urmia, iranارومیه: کیلومتر 11 جاده سرو، دانشگاه ارومیه، دانشکده دامپزشکی

چکیده

سابقه و هدف: شقایق دریایی از جنس اکتینیا در مناطق جزری سواحل صخره ای شمال اسپانیا بسیار متداول است. اکتینیا فراگاسیا یکی از گونه های مهم است که پروتئین سمی فراگاسیاتوکسین c را جهت دفاع و شکار ترشح می کند. هدف اصلی از این مطالعه، انتقال پلاسمید حاوی ژن کدکننده فراگاسیاتوکسین c به اشیرشیاکلی سویه bl21، بیان و یافتن شرایط مطلوب بیان می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی برای انتقال شیمیایی، باکتری ها جهت جذب پلاسمید حاوی ژن frac به وسیله کلسیم کلراید سرد شسته و جهت اطمینان از انتقال پلاسمیدها، باکتری ها روی محیط حاوی آنتی بیوتیک مناسب (آمپی سیلین) کشت داده شدند. برای اطمینان بیش تر، استخراج پلاسمیدها در حجم کم با استفاده از کیت استخراج پلاسمید gf-1 صورت گرفت. سپس تحت برش آنزیم های ncoi وhind ііі و هم چنین کنترل pcr قرار گرفتند. بعد از تأیید حضور پلاسمید حاوی ژن frac در باکتری میزبان، باکتری ها جهت یافتن شرایط مطلوب بیان پروتئین frac توسط iptg 1mm در زمان های مختلف و دمای cº20 القا شدند. پس از جمع آوری باکتری های بیان کننده frac در زمان های مختلف، بیان آن ها روی ژل سدیم دودسیل سولفات پلی آکریل آمید(sds-page) مشهود بود. یافته ها: نتایج ما نشان داد که پلاسمید حاوی ژن frac با موفقیت انتقال یافت. هم چنین نتایج sds-page نشان داد که frac در زمان های 6 و 8 ساعت با استفاده از iptg 1mm در دمای cº20 بیش ترین بیان را دارند. استنتاج: با توجه به نتایج، هر دو مرحله انتقال شیمیایی تأثیر قابل توجهی در کارایی انتقال دارند. رعایت اصول و دمای مطلوب می تواند ما را دریافتن شرایط مطلوب برای بیان هر پروتئین خاص در باکتری ها یاری کند.

اسناد مشابه

  • بهینه‌سازی بیان سم شقایق دریایی (فراگاسیاتوکسین C) در باکتری E.coli سویه BL21

    مقاله۲۰۱۶مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانبابک عبدی، رشید جامعی، مهدی ایمانی

    سابقه و هدف: شقایق دریایی از جنس اکتینیا در مناطق جزری سواحل صخره‌ای شمال اسپانیا بسیار متداول است. اکتینیا فراگاسیا یکی از گونه‌های مهم است که پروتئین سمی فراگاسیاتوکسین C را جهت دفاع و شکار ترشح می‌کند. هدف اصلی از این مطالعه، انتقال پلاسمید حاوی ژن کدکننده فراگاسیاتوکسین C به

  • بهینه سازی بیان آنزیم سلوبیوهیدرولاز cel6B در باکتری E. coli BL21(DE3)

    مقاله۲۰۲۱ژنتیک نوینفهیمه حیدری قره سو، نسرین مشتاقی، براتعلی مشکانی، سعید ملکزاده شفارودی

    مصرف انرژی و تاثیر آن بر محیط‌زیست یکی از بزرگترین چالش‌های بشر است و تولید اتانول زیستی یا سایر مواد شیمیایی به وسیله هیدرولیز آنزیمی سلولز می‌تواند تاثیر مهمی در جایگزینی سوختهای فسیلی و کاهش تولید CO2 در اتمسفر داشته باشد. آنزیم Cel6B از باکتری گرمادوست Thermobifidia fusca، یک

  • کلونینگ و بیان پروتئین m۲ ویروس آنفلوانزا h۱n۱ در باکتری ecoli سویه bl۲۱(de۳)

    مقالهمجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولیفاطمه جعفری نژاد، fatemeh jafarinejad 1- biology department, azad university of ahar, ahar, iran- گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اهر، اهر، ایران گلناز اسعدی تهرانی، golnaz asadi tehrani 2- microbiology & animal biology, azad university of zanjan,zanjan, iran- گروه میکروبیولوژی و زیست جانوری، دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان، زنجان، ایران محمد امین بخش، mohammad aminbakhsh 1- biology department, azad university of ahar, ahar, iran- گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اهر، اهر، ایران بهرام کاظمی

    سابقه و هدف: ویروس انفلوانزا a یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه می باشد و از سال 1960 میلادی بر علیه آن واکسن موثر در دسترس بوده است. تغییرات مداوم آنتی ژنیک ویروس چالش بزرگی در مسیر تولید سالیانه واکسن می باشد. در حال حاضر محققین روی آنتی ژنهای ثابت ویروس مطالعه می کنند. پروتئ

  • کلونینگ و بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا H1N1 در باکتری Ecoli سویه BL21(DE3)

    مقاله۲۰۱۴مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولیفاطمه جعفری نژاد، گلناز اسعدی تهرانی، محمد امین بخش، بهرام کاظمی

    سابقه و هدف: ویروس انفلوانزا A یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه می باشد و از سال 1960 میلادی بر علیه آن واکسن موثر در دسترس بوده است. تغییرات مداوم آنتی ژنیک ویروس چالش بزرگی در مسیر تولید سالیانه واکسن می باشد. در حال حاضر محققین روی آنتی ژنهای ثابت ویروس مطالعه می کنند. پروتئ

  • طراحی و ساخت کاست ژنی ctxb-gfp-stxbو بررسی بیان آن در e. coli سویه (bl۲۱ (de۳

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی فساعقیل اسماعیلی، aghil esmaeili حسین هنری، hossein honari صادق صفایی، sadegh safaei مهدی غفرانی

    زمینه و هدف : پروتئین­های نوترکیب کایمریک ، به منظور افزایش بیان پروتئین ­ های محلول، تسهیل در تخلیص آن­ها و تولید پلی­پپتید چند­منظوره، ابداع شده­اند. هدف از این تحقیق، ساخت کاست ژنی ctxb -gfp-stxb و بررسی بیان آن به منظور بررسی میزان جذب و دفع آنتی­ژن الحاقی در مطالعات بعدی می

  • بهینه سازی بیان تولید پروتئین نوترکیب PapG.AcmA در ﺳﻮﯾﻪ بیانی اﺷﺮﯾﺸﯿﺎ ﮐﻠﯽ

    مقاله۲۰۱۶دنیای میکروب هاامیر میرزایی، فاطمه اشرفی، محمدرضا معصومیان

    سابقه و هدف: اشریشیا کلی یوروپاتوژن (UPEC) یکی از مهمترین باکتری های بیماری زاست که باعث عفونت مجاری ادراری می شود و هنوز هیچ واکسن انسانی علیه آن ساخته نشده است. هدف از این مطالعه، ﺑﻬﯿﻨﻪ ﺳﺎزی بیان پروتئین ﻧﻮﺗﺮﮐﯿﺐ PapG به همراه پروتئین لنگری لاکتوباسیلوس به نام AcmA در اشریشیا کل