بررسی میزان آپوپتوز در سلول های هیپوکامپ به دنبال تزریق داخل وریدی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان در مدل ایسکمی- ریپرفیوژن موش صحرایی

باقر پورحیدر، bagher pourheydar department of anatomyfaculty of medicine, neurophysiology research center, urmia university of medical sciencesگروه علوم تشریحی، دانشکده پزشکی ارومیه، مرکز تحقیقات نوروفیزیولوژی، دانشگاه پزشکی ارومیهسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (urmia university of medical sciences) مریم شاهی، maryam shahi department of anatomy, faculty of medicine, urmia university of medical sciences, urmia, iran, tel: +9844 32780803ارومیه، دانشگاه علوم پزشکی ارومیه، دانشکده پزشکی، تلفن: 32780803-044سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (urmia university of medical sciences) غلامحسین فرجاه ،، gholam hossein farjah department of anatomy, faculty of medicine, neurophysiology research center, urmia university of medical sciencesگروه علوم تشریحی، دانشکده پزشکی ارومیه، مرکز تحقیقات نوروفیزیولوژی، دانشگاه پزشکی ارومیهسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (urmia university of medical sciences) معصومه جوانمرد، masoome javanmard department of anatomy, faculty of medicine, urmia university of medical sciencesگروه علوم تشریحی، دانشگاه پزشکی ارومیهسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (urmia university of medical sciences) مجتبی کریمی پور، mojtaba karimipour department of anatomy, faculty of medicine, urmia university of medical sciencesگروه علوم تشریحی، دانشگاه پزشکی ارومیهسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (urmia university of medical sciences) فاطمه اتابکی، fatemeh atabaki department of anatomy, faculty of medicine, urmia university of medical sciencesگروه علوم تشریحی، دانشگاه پزشکی ارومیهسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (urmia university of medical sciences)

چکیده

پیش زمینه و هدف: ایسکمی مغزی به عنوان یک معضل بزرگ جهانی شناخته شده است و ریپرفیوژن متعاقب آن درنهایت منجر به مرگ برنامه ریزی شده سلولی یا آپوپتوز می گردد. نواحی مشخصی از مغز و انواع خاصی از نورون ها ازجمله نورون های هرمی ناحیه ca1 هیپوکامپ نسبت به ایسکمی مغزی حساس ترند. یکی از روش های درمانی که امروزه به طور شایع در بین محققین رواج دارد سلول درمانی (cell therapy) می باشد. لذا در این مطالعه برآن شدیم تا میزان آپوپتوز در سلول های هیپوکامپ را پس از تزریق داخل وریدی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان (bmscs) در مدل ایسکمی- ریپرفیوژن موردبررسی قرار دهیممواد و روش ها: در این مطالعه 40 سر موش صحرایی نر بالغ با وزن 250-300 گرم به طور تصادفی به پنج گروه هشت تایی تقسیم شدند که شامل گروه های کنترل، شم، ایسکمی، vehicle،treatment بودند گروه شم متحمل استرس جراحی بدون مسدود کردن شریان های کاروتید مشترک شد. در گروه ایسکمی شریان های کاروتید مشترک هردو طرف به مدت بیست دقیقه مسدود شده و سپس مجدداً جریان خون برقرار شد. در گروه vehicle ایسکمی ایجادشده و پس از 7 روز 30µl pbs از طریق ورید دمی تزریق شد. در گروه treatment ایسکمی ایجاد شد و پس از 7 روز سلول های bmsc به تعداد 800 هزار در 30µl سوسپانسیون سلولی از طریق ورید دمی تزریق شد.72 ساعت قبل از تزریق سلول ها با brdu نشان دار شدند. در روز 12 پس از ایسکمی با روش پرفیوژن داخل قلبی و با پارافرمالدئید 4 درصد موش ها فیکس شدند و مغز آن ها خارج گردید و پس از پردازش بافتی برش های 5 میکرونی تهیه شد. جهت شناسایی سلول های bmsc بررسی ایمونوهیستوشیمی با آنتی بادی anti-brdu انجام شد. برای نشان دادن سلول های آپوپتوتیک از رنگ آمیزی تانل استفاده شد.یافته ها: در نمونه های ایسکمی ایندکس آپوپتوز 37/43 درصد مشاهده شد که این میزان در گروه درمان 61/23 درصد بود این یافته ها نشان می دهند که میزان آپوپتوز در گروه تحت درمان با سلول های بنیادی مغز استخوان در مقایسه با گروه ایسکمی بسیار کمتر بودنتیجه گیری: ایسکمی- ریپرفیوژن به مدت 20 دقیقه باعث آسیب و مرگ نورونی وسیع در هیپوکامپ به ویژه در ناحیه ca1 می شود و تزریق سلول های بنیادی مغز استخوان به طور معنی داری موجب کاهش تعداد نورون های آپوپتوتیک می گردد.