کلون کردن اپیتوپ های خطی آنتی ژن p۱۴-۳-۳ در وکتور pegfp-n۱ به عنوان یک مدل واکسن dnaجهت القا ایمنی علیه کیست هیداتیک و بررسی بیان آن در رده سلولی cho
رقیه مصری، r mesri 1department of cell and molecular biology, kharazmi university, tehran, iranگروه سلولی و مولکولی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران مجید اسمعیلی زاد، m esmaelizad 2department of central labratoary, razi vaccine and serum research institute, karaj, alborz, iran.آزمایشگاه مرکزی، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، البرز، ایران سید عبدالحمید انگجی، sa angaji 1department of cell and molecular biology, kharazmi university, tehran, iranگروه سلولی و مولکولی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران محمد طهماسب، m tahmaseb 1department of cell and molecular biology, kharazmi university, tehran, iranگروه سلولی و مولکولی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران مژگان احمدزاده، m ahmadzadeh 1department of cell and molecular biology, kharazmi university, tehran, iranگروه سلولی و مولکولی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران سمیه محمدی، s mohammadi 1department of cell and molecular biology, kharazmi university, tehran, iranگروه سلولی و مولکولی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران
چکیده
زمینه و هدف: کیست هیداتیک در اثر آلودگی با لارو انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس ایجاد میشود. در مرحله لاروی این انگل آنتیژنهای متعددی تولید میشود که یکی از این آنتیژنها، آنتیژنی از خانواده پروتئینهای p14-3-3 میباشد و واکسن نوترکیب آن ایمنی زایی قابل توجهی را در موش القا کرده است. با توجه به ایمونوژنتر بودن نواحی اپیتوپی آنتیژنها و تولید پاسخ ایمنی th1 مطلوب هدف از این مطالعه کلون کردن اپیتوپهای خطی این آنتیژن شناسایی شده در وکتور n1–pegfp بود که در ساخت یک مدل dna واکسن مؤثر بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی پس از شناسایی اپیتوپهای خطی آنتیژن p14-3-3 توسط نرمافزارهای بیوانفورماتیکی، توالی کدکننده آن به صورت سنتتیک فراهم شد، پس از تکثیر با واکنش pcr و هضم توسط آنزیم محدود کننده xhoi، در وکتور n1 – pegfp تخلیص شده با روش سمبروک تغییر یافته که همراه با استفاده از cacl2 وpeg6000 میباشد کلون شده و کلونیهای مثبت حاوی وکتور نوترکیب ابتدا به روش colony pcr و سپس توالی یابی تأیید شد. برای بررسی بیان در سلولهای یوکاریوت با روش الکتروپوریشن به رده سلولیcho منتقل شدند. یافتهها: توالی کد کننده اپیتوپهای خطی آنتیژن p14-3-3 انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس پس از شناسایی، سنتز و تکثیر در وکتورpegfp-n1 که تخلیص آن با روش جدید به خوبی با حداکثر غلظت پلاسمید و حداقل مقدار rna همراه است، کلون شده و پس از تأیید کلونینگ، بیان آن نیز در رده سلولی cho به عنوان نمونهای از سلولهای یوکاریوت به صورت موفقیتآمیز با میکروسکوپ فلورسنت انجام شد و استفاده از سازه حاصل در قالب واکسن ژنی برای بررسی پاسخ ایمنی در مدلهای موشی در مراحل بعدی پژوهش انجام خواهد شد. نتیجهگیری: نتایج حاصل از توالی یابی، تأیید کننده کلونینگ صحیح توالی کد کننده اپیتوپهای خطی آنتیژن ζ p14-3-3 انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pegfp-n1 بوده و نتایج حاصل از میکروسکوپ فلورسانس نشانگر بیان موفقیتآمیز پروتئین نوترکیب در سلول یوکاریوتیcho میباشد
ABSTRACT Background & purpose: Hydatidosis is a zoonotic disease that caused by infection with the larvae of Echinococcus granulosus. Different antigens produced in larval stage of this parasite that recombinant vaccine base these antigens created significant immunity in infected
مقاله۲۰۱۵مجله علمی - پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی سبزوارسمیه محمدی، مجید اسماعیلی زاده، سید عبدالحمید انگجی، محمد طهماسب
زمینه و هدف: کیست هیداتیک، بیماریی است که ازطریق تخم انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس دفع شده از مدفوع سگ آلوده به انسان و دام منتقل می شود. این انگل، یکی از کرم های نواری خانواده ی taeniidae می باشد که باعث ایجاد مشکلات بهداشتی گسترده در انسان و خسارت های اقتصادی به صنعت دامپروری می ش
زمینه و هدف: انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل بیماری مشترک بین انسان و دام به نام کیست هیداتیک یا هیداتیدوزیس است؛ موفقترین واکسن نوترکیب علیه این بیماری از کلون کردن ژن کد کننده آنتیژن 25 کیلو دالتونی آن یعنی EG95 در وکتور pGEX میباشد که ایمنی سلولی و همورال قابل‌توجهی را در گ
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی فسارقیه مصری، roghayeh mesri department of cellular & molecular, faculty of biological sciences, kharazmi university, tehran, iran.گروه آموزشی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران مجید اسمعیلی زاد، majid esmaelizad central lab, razi vaccine and serum research institute, karaj, iran.بخش آزمایشگاه مرکزی، مؤسسه تحقیقاتی واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران مژگان احمدزاده، mmozhghan ahmadzadeh department of cellular & molecular, faculty of biological sciences, kharazmi university, tehran, iran.گروه آموزشی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران سمیه محمدی
زمینه و هدف: انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل بیماری مشترک بین انسان و دام به نام کیست هیداتیک یا هیداتیدوزیس است؛ موفقترین واکسن نوترکیب علیه این بیماری از کلون کردن ژن کد کننده آنتیژن 25 کیلو دالتونی آن یعنی eg95 در وکتور pgex میباشد که ایمنی سلولی و همورال قابل توجهی را در گ
اکینوکوکوس گرانولوزوس انگلی است که آلودگی با مرحله لاروی آن سبب ایجاد بیماری هیداتیدوزیس در انسان و نشخوارکنندگان می شود؛ تاکنون نزدیک به ده ژنوتیپ از این انگل شناسایی شده است. کشور ایران جزء مناطق با شیوع بالا است، بر این اساس مقابله با این انگل از لحاظ بهداشت جامعه اهمیت خاصی د
در این پروژه به منظور طراحی و ساخت یک dna واکسن موثر علیه کیست هیداتیک با حداقل ساختار ممکن و حداکثر قدرت تحریک ایمنی از توالی کدکننده اپی توپ های خطی آنتی ژن p14-3-3 که ایمونوژن تر می باشد و در اکثر مراحل زندگی انگل و سروتیپ های متعدد با ساختار حفاظت شده وجود داشته و واکسن نوترک