مقاله

به کارگیری روش pcr-elisa با استفاده از ترادف re در تشخیص کمی توکسوپلاسموز تجربی در مدل موشی (rattus norvegicus)

roghaye norouzi، m.sc. student, department of medical parasitology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran abdolhossein dalimi، professor, department of medical parasitology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mehdi forouzandeh، associated professor, department of medial biotechnology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran fatemeh ghaffarifar، associated professor, department of medical parasitology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran

چکیده

هدف: توکسوپلاسما ممکن است ایجاد آسیب در جنین و از انگل های فرصت طلب در بیماران با ایمنی سرکوب شده است. استفاده از روش های مولکولی برای تشخیص بیماری حساس تر از روش های سرولوژیک است. استفاده از روش pcr-elisa حساسیت و ویژگی بالا، زمان تشخیص توکسوپلاسموزیس نیز سریع تر است. در این پژوهش از روش pcr-elisa با استفاده از قطعه dna re، برای تشخیص توکسوپلاسموزیس به کار رفت. از مزایای این روش حساسیت و اختصاصی بودن و در نهایت تشخیص سریع توکسوپلاسموزیس است. مواد و روش ها: در این مطالعه از روش کمی pcr-elisa برای تشخیص توکسوپلاسموزیس در 15 سر رت استفاده شد. بدین منظور pcr-elisa برای تشخیص سریع توکسوپلاسموزیس راه اندازی شد. در این روش آغازگرهای اولیگونوکلئوتیدی برای هدف گیری ژن re مربوط به تاکی زوئیت به طول 138 جفت باز انتخاب شده و برای تکثیر dna توکسوپلاسما گونده ای، از فرایند pcr و نشاندار کردن همزمان محصول به دست آمده از آن با دیگوکسی ژنین استفاده شد. قطعه نشاندار شده با dig، با پروب اولیگونوکلئوتید بیوتینیله شده اختصاصی دورگه می شود و سپس به استرپتاودین پوشش دار شده در پلیت اضافه می شود. دورگه dna-dna ایجاد شده با اضافه کردن آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین کونژوگه شده با پراکسیداز و با روش کلریمتری قابل شناسایی است. نتایج: با استفاده از سیستم pcr-elisa، ژن re توکسوپلاسما گونده ای در مدت 4 ساعت و با حساسیت بالا مورد شناسایی قرار گرفت. در ضمن آزمایش هایی برای بررسی حساسیت روش به کار برده شده، انجام گرفت و منحنی استاندارد مربوط به حساسیت روش نیز رسم شد. dna توکسوپلاسما پس از 4 ساعت قابل شناسایی است و در این روش عوامل دیگر دخالت ندارند؛ بنابراین فقط این انگل تکثیر و شناسایی می شود. نتیجه گیری: کارایی pcr-elisa ارزیابی شد و ارزیابی ها نشان داد که از مزیت های این روش سریع، حساس، مطمئن و ساده بودن آن است؛ بنابراین می توان از آن به عنوان یک روش تشخیصی استفاده کرد.

اسناد مشابه

  • تشخیص اسینتوباکتر بائومانی با استفاده از روش PCR-ELISA

    مقاله۲۰۱۷مجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکردامانی, جعفر، امینی راد, سوزان، ایمانی فولادی, عباسعلی، سعیدی, پردیس

    زمینه و هدف: اسینتوباکتر بومانی عامل عفونت های دستگاه تنفسی، دستگاه ادراری، خون و زخم ها به خصوص در بخش مراقبت های ویژه می باشد و توانایی کسب مقاومت دارا می باشد. به منظور تشخیص به موقع و پیگیری فرایند درمان این عفونت ها، لازم است که تکنیک ها به طور مستمر اصلاح شوند. با توجه به ا

  • طراحی و به کارگیری روش rt-pcr elisa multiplex برای تشخیص عفونت همزمان hcv و hiv-۱

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیzahra khanlari، m.sc. student, department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mehrdad ravanshad، assistant professor, department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran manouchehr rasouli، assistant professor, department of immunology, professor alborzi clinical microbiology research center, shiraz university of medical sciences, shiraz, iran mazyar ziyaeyan

    هدف: علیرغم غربالگری خون های اهدایی با روش های حساس مبتنی بر شناسایی آنتی بادی، همچنان خطر انتقال عفونت های ویروسی وجود دارد. بنابراین طراحی روش های حساس مبتنی بر شناسایی اسید نوکلئیک مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این تحقیق طراحی روشی حساس تر در مرحله شناسایی نسبت به روش های م

  • تشخیص زود هنگام توکسوپلاسموز تجربی در خون رت به روش PCR

    مقاله۲۰۰۴تحقیقات دامپزشکیدکتر بهرام کاظمی دمنه، دکتر عبدالحسین دلیمی اصل، دکتر محمود شریفیان درچه

    هدف : تعیین زمان ظهور و بقای انگل در خون رت هایی که به صورت تجربی به توکسوپلاسما گوندیی آلوده شده‌اند و همچنین تشخیص زودرس آلودگی نوکسوپلاسمایی در رت با استفاده از روش PCR. طرح : مطالعه تجربی. حیوانات: تعداد پنج سر رت عاری از توکسوپلاسما و 10 سر رت آلوده به توکسوپلاسما گوندیی است

  • تشخیص زود هنگام توکسوپلاسموز تجربی در خون رت به روش pcr

    مقاله۲۰۰۴مجله تحقیقات دامپزشکی (journal of veterinary research)دکتر محمود شریفیان درچه، دکتر عبدالحسین دلیمی اصل، دکتر بهرام کاظمی دمنه

    هدف : تعیین زمان ظهور و بقای انگل در خون رت هایی که به صورت تجربی به توکسوپلاسما گوندیی آلوده شده اند و همچنین تشخیص زودرس آلودگی نوکسوپلاسمایی در رت با استفاده از روش pcr. طرح : مطالعه تجربی. حیوانات: تعداد پنج سر رت عاری از توکسوپلاسما و 10 سر رت آلوده به توکسوپلاسما گوندیی است

  • تشخیص سریع و اختصاصی سالمونلا تیفی موریوم با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز-الایزا (pcr-elisa)

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیhassan ardestani، department of biology, imam hossein university, tehran, iran seyed latif mousavi gargari، department of biology, faculty of basic sciences, shahed university, tehran, iran shahram nazarian، department of biology, baqiyatallah university, tehran, iran jafar amani

    هدف: سالمونلا تیفی موریوم یکی از بیماری زاهای مهم غذایی است که باعث ایجاد گاستروانتریت می شود. در این تحقیق روش pcr-elisa برای شناسایی سالمونلا تیفی موریوم به کار گرفته شده است. مواد و روش ها: ژن rfb، که مسئول بیوسنتز آنتی ژن o از لیپوپلی ساکارید باکتری است، به عنوان توالی هدف ان

  • به کارگیری روش real time rt-pcr با استفاده از رنگ سایبرگرین به منظور سنجش کمی ویروس نقص سیستم ایمنی انسانی نوع یک (hiv-۱) و مقایسه نتایج به دست آمده با نتایج حاصل از روش کوباس آمپلی کور

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیsaeid amel jamehdar، department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran farzaneh sabahi، department of virology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mahdi forouzandeh، department of biotechnology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mahboubeh haji abdolbaghi

    هدف: در این تحقیق روش real time rt-pcrبا استفاده از رنگ سایبرگرین به منظور سنجش کمی ویروس نقص سیستم ایمنی انسانی نوع یک (hiv-1) راه اندازی شد. مواد و روش ها: ایـن آزمایش بر اســاس تــکثیر ناحیه ژن pol ویروس بوده و از دستگاه ترموسایکلرabi 7500 استفاده شد. 26 بیمار مبتلا به hiv-1 ب