شناسایی و تشخیص گونه های شایع مالاسزیا در ایران با استفاده از روشrcr-rflp
چکیده
مقدمه: مخمرهای فرصت طلب جنس مالاسزیا متعلق به شاخه بازیدیومیکوتاها و خانواده کریپتوکوکاسه می باشند که به طور طبیعی روی پوست انسان و حیوانات خونگرم ساکن هستند. این مخمرها تحت شرایط خاصی قادر به ایجاد بیماری نظیر تینه آ ورسیکالر، درماتیت سبوره،... و حتی عفونتهای سیستمیک است. در سالهای اخیر در پی استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی، مورفولوژیکی و روشهای مولکولی 9 گونه از جنس مالاسزیا شناسایی شده است. مواد و روشها: تحقیق اخیر با هدف به کارگیری روشهای pcr-rflp برای شناسایی این گونه ها و بررسی سوش های شایع در ایران پایه ریزی شد. ابتدا نمونه های به دست آمده بر اساس تستهای متداول میکروسکوپی و ماکروسکوپی و خصوصیات بیوشیمیایی در حد گونه شناسایی شدند و در آزمایشات مولکولی الگوهای واحدی برای هر یک از 3 گونه شایع مالاسزیا به دست آمد. نتایج: قطعات تولیدی pcr در حدودbp600 تا bp800 طول داشتند. محصول pcr مالاسزیا سیمپودیالیس (bp 600 تا bp 700) کوچکتر از محصول pcr سایر گونه های مالاسزیا بود و از این رو به راحتی و تنها از روی باند مربوط به pcr که با استفاده از پرایمرهای its1 و its4به دست آمده، از سایر گونه های مالاسزیا قابل افتراق بود. محصول pcr دو گونه مالاسزیا گلوبوزا و مالاسزیا فورفور کاملاً مشابه هم بوده و افتراق این دو گونه بر اساس قطعات تولیدیits1/4 pcr تقریباً غیر ممکن است. برای شناسایی و افتراق دو گونه مزبور از الگوی rflp با آنزیم ecor1 استفاده شد. بحث: استفاده از روشهای مولکولی، شناسایی سریع و دقیق گونه های مختلف مالاسزیا را امکان پذیر می سازد. نتایج به دست آمده از روش rcr-rflp با نتایج به دست آمده از روشهای متداول آزمایشگاهی، کاملاً مطابقت داشت.