ارزیابی حساسیت و ویژگی روش تکثیری بر پایه اسید نوکلئیک با روش های میکروسکوپی توام با کشت و rt-pcr برای تشخیص عامل لیشمانیوزیس جلدی

علیرضا نیازی، ar niazi msc of medical biotechnology, faculty of advanced medical technologies, golestan university of medical sciences, gorgan, iranدانشگاه علوم پزشکی گلستان فرامرز کوهسار، f koohsar phd student of parasitology, laboratory science research center, golestan university of medical sciences, gorgan, iranدانشگاه علوم پزشکی گلستان فاطمه غفاری فر، f ghaffarifar associate professor of parasitology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iranدانشگاه تربیت مدرس، تهران هاجر ضیایی هزار جریبی، h ziaei-hezarjaribi, assistant professor of parasitology, deo of parasitology, school of medicine, mazandaran university of medical sciences, sari, iranدانشگاه علوم پزشکی مازندران فاطمه مسگریان، f mesgarian msc of parasitology, gonbad health center, golestan university of medical sciences, gorgan, iranدانشگاه علوم پزشکی گلستان اوغل نیاز جرجانی، on jorjani assistant professor of parasitology, laboratory science research center, golestan university of medical sciences, gorgan, iranدانشگاه علوم پزشکی گلستان

چکیده

چکیده زمینه و هدف: روش میکروسکوپی همراه با کشت، روش استاندارد طلایی برای تشخیص انگل لیشمانیا است . استفاده از روش های ملکولی از جمله روش rt-pcr برای تشخیص این بیماری در مقایسه با روش های میکروسکوپی از حساسیت و ویژگی بالاتری برخوردار است. اما با توجه به گرانی تجهیزات آن و زمانی که برای انجام آن صرف می-شود به صورت گسترده مورد استفاده قرار نمی گردد. استفاده از روش تکثیری بر پایه ی اسید نوکلئیک (nasba) به دلیل عدم نیاز به دستگاه ترموسایکلر و همچنین شناسایی انگل زنده، دارای ارزش بالایی است. هدف از این مطالعه، بررسی حساسیت و ویژگی nasba برای تشخیص ملکولی عامل لیشمانیوزیس جلدی می باشد. روش بررسی: از 28 نمونه زخم پوستی مشکوک به لیشمانیوزیس جلدی، rna انگل استخراج شد. سپس به کمک پرایمرهای اختصاصی طراحی شده برای ناحیه ی 18srrna لیشمانیا، این ناحیه به وسیله ی واکنش ایزوترمال nasba مورد تکثیر قرار گرفت و در جهت افزایش حساسیت، محصول واکنش تکثیری به وسیله پروب فلورسانس ملکولی syber gold در بافر tbe(1x) الکتروفورز شد. همچنین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی، بر روی نمونه ها واکنش rt-pcr نیز انجام شد. یافته ها: دراین مطالعه روش nasba و روش rt-pcrبرای تشخیص انگل لیشمانیا در زخم به ترتیب از حساسیت 81 درصد و 51 درصد و ویژگی 100 درصد برخوردار بودند. نتیجه گیری: روش ایزوترمال nasba با حساسیت و ویژگی بالا به منظور شناسایی لیشمانیوز جلدی می توان استفاده کرد