مقایسه روش طیف سنجی جرمی maldi-tof با روش های ملکولی و بیوشیمیایی در شناسایی انتروکوکوس فسیوم و انتروکوکوس فکالیس جداشده از نمونه های بیمارستانی

حسین صمدی کفیل، h samadikafil ,department of medical bacteriology, faculty of medical sciences, tarbiatmodares universityگروه باکتری شناسی پزشکی،دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران اشرف محبتی مبارز، m mohebatimobarez department of medical bacteriology, faculty of medical sciences, tarbiatmodares universityدانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران مهدی فروزنده مقدم، m forouzandehmoghadam department of biotechnology, faculty of medical sciences, tarbiatmodares university, tehran, iranگروه بیوتکنولوژی دانشکده پزشکی،دانشکده علوم پزشکی،دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

چکیده

زمینه و هدف: انتروکوکوس ها باکتری های گرم مثبتی هستند که به عنوان فلور نرمال در روده انسان، محصولات لبنی و محیط اطراف حضور دارند ولی در سال های اخیر به عنوان یک بیماریزای مهم فرصت طلب در عفونت های بیمارستانی ظهور کرده اند. در این مطالعه به بررسی و مقایسه کارآمدی روش نوین طیف سنجی جرمی m‏aldi-tofدر انتروکوکوس فکالیس و انتروکوکوس فسیوم پرداخته شده است و با روش های بیوشیمیایی و ملکولی مورد استفاده در تشخیص مقایسهشده است. روش بررسی: 75 نمونه کلینیکی مشکوک به انتروکوکوس جهت بررسی بیوشیمیایی، ملکولی و طیف سنجی جذبی انتخاب شدند و با آزمون های بیوشیمیایی هیدرولیز اسکولین، کاتالاز، وجود پیرولیدونیل آمینوپپتیداز، رشد در مجاورت 5/6% نمک، حرکت، رشد در محیط حاوی04/0% تلوریت، و تست قندهای ال-آرابینوز و سوربیتول مورد بررسی قرار گرفتند. سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی بوسیله واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد بررسی و با استفاده از دستگاه طیف سنجی جرمی و نرم افزار بیوتایپر مورد تحلیل قرار گرفتند. یافته ها: در 30 نمونه انتروکوکوس فسیوم، در 42 نمونه انتروکوکوس فکالیس و در 3 نمونه عفونت با هر دو باکتری شناسائی شدند. در روش های بیوشیمیایی 2 نمونه انتروکوکوس فسیوم تست آرابینوز منفی و در یک نمونه انتروکوکوس فکالیس تست تلوریت منفی بود. در بررسی با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز تمامی نمونه ها به درستی تشخیص داده شدند ولی در 2 نمونه با وجود تکرار، باندهای قابل افتراق مشهودی نداشتند. در بررسی با استفاده از طیف سنجی جرمی در تمامی نمونه ها تمامی آزمون ها و تکرارها با قابلیت افتراق بالا و به درستی شناسائی شدند. نتیجه گیری: با توجه به نتایج این بررسی روش طیف سنجی جرمی m‏aldi-tofروش قابل اطمینان و دقیقی می باشد که در شناسائی انتروکوکوس فکالیس و انتروکوکوس فسیوم قادر به تشخیص با حساسیت 100% می باشد و با روش های بیوشیمیایی و ملکولیاز نظر سرعت اجرا و دقت قابل مقایسهمی باشد