شناسائی و تعیین ژنوتیپ مولکولی مایکوپلاسما ژنیتالیوم با روش pcr- rflp در زنان مبتلا به عفونت های ژنیتال

رضا میرنژاد، reza mirnejad molecular biology research center, baqiyatallah(a.s.) university of medical sciences, tehran, iran.مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله(عج نور امیرمظفری، noor amirmozafari department of microbiology, school of medicine, iran university of medical sciences, tehran, iran.گروه میکرب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران بهرام کاظمی، bahram kazemi cell and molecular biology research center, shahid beheshti university of medical science, tehran, iran.مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی

چکیده

زمینه و اهداف: به دلیل مشکلات زیاد جهت کشت مایکوپلاسما ژنیتالیوم، هیچ روش فنوتیپی برای تیپ بندی آن وجود ندارد. ولی قابل دسترس بودن سکانس ژنوم کامل آن فرصتی برای اهداف تیپ بندی ایجاد کرده است. این مطالعه جهت شناسائی و تعیین ژنوتیپ مولکولی مایکوپلاسما ژنیتالیوم با pcr- rflp در زنان مبتلا به عفونت های ژنیتال انجام گرفت. روش بررسی: از 210 بیمار مراجعه کننده به درمانگاه زنان بیمارستان حضرت رسول(ص) طی سال های 88-1387 نمونه سواب از ناحیه ژنیتال (واژن و سرویکس) تهیه شد. نمونه در بافر (pbs) به آزمایشگاه ارسال شد. برای انجام pcr- rflp از یک جفت پرایمر اختصاصی مایکوپلاسما ژنیتالیوم برای تکثیر ناحیه bp465 ژن 16s rrna استفاده شد. بعد از انجام pcr و سکانس کردن محصول آن، نمونه های مثبت تحت اثر آنزیم های محدودالاثر ,alui ,taq i, caci8, bbsi ecori قرار گرفتند. در نهایت ژنوتیپ مایکوپلاسما ژنیتالیوم مشخص گردید. یافته ها: از 210 نمونه ژنیتال، 11 نمونه (2/5%) به روش pcr حاوی مایکوپلاسما ژنیتالیوم بود. نتایج pcr- rflp نشان داد که همگی از یک ژنوتیپ بودند و سکانس تمام آنها با سکانس ژنوم سویه g37 مایکوپلاسما ژنیتالیوم یکسان بود. از بین آنزیم های فوق تنها آنزیم محدودالاثر caci8 توانایی تایپینگ و شناسائی مایکوپلاسما ژنیتالیوم را داشت. نتیجه گیری: مطالعه حاضر نشان داد که مایکوپلاسما ژنیتالیوم از نمونه ژنیتال جدا می شود. تمام ایزوله ها یکسان هستند و در الگوهای آنزیمی آنها تفاوتی مشاهده نشد. لذا، در بین آنها هتروژنسیتی ژنتیکی وجود ندارد و عفونت در افراد مختلف می تواند ناشی از انتشار یک سویه منحصر بفرد باشد.