کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب فیوژن tat-nef ویروس hiv-۱ در سیستم بیانی پروکاریوتی
سمیه کدخدایان، somayeh kadkhodayan department of biology, sciences and research branch, islamic azad university, tehran, iran.گروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. شیوا ایرانی، shiva irani department of biology, science and research branch, islamic azad university, tehran, iranگروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (islamic azad university science and research branch) سید مهدی سادات، seyed mehdi sadat department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.بخش هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (islamic azad university science and research branch) فاطمه فتوحی، fatemeh fotouhi influenza research lab., department of virology, pasteur institute of iran, tehran, iran.آزمایشگاه تحقیقاتی آنفلوانزا، بخش ویروس شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (pasteur institute of iran) اعظم بوالحسنی، azam bolhassani department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.بخش هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (pasteur institute of iran)
چکیده
زمینه و هدف: یکی از پروتئین های مهم ویروس hiv-1 به نام nef نقش مهمی در چرخه تکثیر ویروس و پیشرفت بیماری ایدز دارد و القای پاسخ ایمنی بر ضد آن می تواند تا حدی عفونت ویروسی را مهار نماید. به علاوه، بخشی از ناحیه پروتئین فعال کننده رونویسی (tat، اسید آمینه های 48 تا 60) از ویروس hiv توانسته است به عنوان یک پپتید نفوذ کننده سلولی (cpp) عمل نماید. در این تحقیق، برای اولین بار کلونینگ و بیان فیوژن tat-nef در باکتری اشرشیاکلی صورت گرفت. تأیید بیان پروتئین توسط آنالیز وسترن بلات و تخلیص آن از طریق روش رنگ آمیزی معکوس انجام شد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، ابتدا کلونینگ فیوژن tat-nef در وکتور بیانی pgex6p2 صورت گرفت. سپس القای بیان پروتئین نوترکیب tat-nef در باکتری اشرشیا کلی سویه bl21 (de3) توسط القا کننده iptg انجام شد. تأیید بیان از طریق تکنیک sds-page و وسترن بلات با استفاده از آنتی بادی منوکلونال ضد nef صورت گرفت. سپس، تخلیص پروتئین فیوژن توسط تکنیک رنگ آمیزی معکوس از روی ژل انجام شد. یافته ها: نتایج آنالیز pcr و هضم آنزیمی، وجود باند واضح حدود 726 جفت باز را روی ژل آگارز تأیید کرد که نشان گر کلونینگ صحیح فیوژن tat-nef در وکتور بیان پروکاریوتی pgex6p2 بود. هم چنین، وجود باند پروتئینی حدود 54 کیلودالتون روی ژل sds-page نشان گر بیان پروتئین tat-nef بود که توسط آنتی بادی منوکلونال ضد nef در آنالیز وسترن بلات تأیید شد. نتیجه گیری: پروتئین فیوژن نوترکیبtat-nef تخلیص شده به عنوان یک آنتی ژن برای طراحی واکسن پروتئینی در مقابل عفونت ویروس hiv استفاده خواهد شد.
مقاله۲۰۲۲مجله علوم پزشکی پارساحمد فقیه، سید مهدی سادات، اعظم بوالحسنی، شیوا ایرانی
مقدمه: پروتئین تنظیمی Nef و همچنین پروتئین های ساختاری MPER و V3 ویروس HIV-1 از اهداف مهم در مطالعات واکسن به شمار می روند. از این رو در مطالعه حاضر، پروتئین فیوژن Nef-MPER-V3 در سیستم بیانی پروکاریوتی کلون و بیان شد تا به عنوان کاندید مناسب در مطالعات آتی واکسن مورد ارزیابی قرار
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی شهرکردمحمدعلی عارف پور، mohammad ali aref pour گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران شهرام نظریان، shahram nazarian گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران غلامرضا اولاد، gholam reza olad مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی -دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج احسان رضایی
زمینه و هدف: توکسین کلستریدیوم تتانی یا تتانواسپاسمین عامل بیماری مهلک کزاز است. امروزه از توکسوئید آن به عنوان واکسن استفاده می شود. تتانواسپاسمین شامل سه زنجیره l، hn و hc می باشد. زنجیره hc بخش اتصال دهنده و ایمونوژنیک آن است و به عنوان کاندیدای واکسن مطرح می باشد. هدف از این
زمینه و هدف: توکسین کلستریدیوم تتانی یا تتانواسپاسمین عامل بیماری مهلک کزاز است. امروزه از توکسوئید آن به عنوان واکسن استفاده می شود. تتانواسپاسمین شامل سه زنجیره L، HN و HC می باشد. زنجیره HC بخش اتصال دهنده و ایمونوژنیک آن است و به عنوان کاندیدای واکسن مطرح می باشد. هدف از این
مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانهادی محمد زاده، hadi mohammadzade department of medical biotechnology, faculty of medicine, arak university of medical sciences, arak, iranگروه زیست فناوری پزشکی، دانشکده پزشکی، بهزاد خوانساری نژاد، behzad khansarinejad department of microbiology and immunology, faculty of medicine, arak university of medical sciences, arak, iranگروه میکروبشناسی و ایمنیشناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران عبدالرحیم صادقی، abdolrahim sadeghi endocrinology and metabolism research center, department of biochemistry, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iranمرکز تحقیقات غدد و متابولیسم، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران حمید ابطحی
سابقه و هدف: اندازه گیری هورمون متحرک تیروئید (tsh) برای تشخیص و بررسی اختلالات تیروئیدی، بسیار مفید بوده و معمولا از آزمون های ria و elisa برای این منظور می شود. با توجه به اینکه زنجیره آلفا بین tsh و سه هورمون گلیکوپروتئینی lh, fsh و cg شباهت ساختمانی زیادی وجود دارد؛ بنابراین،
خالص سازی پروتئین‌ها یک مرحله ضروری برای بررسی عملکرد و ساختار آنها است. به منظور تسهیل تخلیص، پروتئین‌ها غالباً به برچسب تمایلی متصل می‌شوند. هدف از این تحقیق طراحی و ساخت وکتور pET32b(+)Rh بر اساس وکتور بیانی پرکاربرد pET-32b(+) در جهت تخلیص آسان‌تر پروتئین‌های نوترکیب و تنها ب
مقدمه: ویروس آنفلوانزا H1N1 به عنوان عامل بیماری‌زا و تهدید کننده‌ی حیات انسان مطرح می‌شود. واکسیناسیون، از راه‌های مؤثر برای پیش‌گیری و مهار بیماری آنفلوانزا است. تولید پروتئین نوترکیب هماگلوتینین در سیستم بیانی باکولوویروس، در بستر سلول یوکاریوت حشره (Sf9) به عنوان یک راهکار مؤ