شناسایی ویروس هپاتیت b در بیماران همودیالیزی با استفاده از روش تکثیر هم دمایی به واسطه حلقه (lamp)
چکیده
سابقه و هدف: شناسایی بیماری هپاتیت b یکی از مشکلات اساسی مراکز همودیالیز محسوب می شود. هدف از این پژوهش راه اندازی و بهینه سازی روش مولکولی تکثیر هم دمایی به واسطه حلقه (lamp) برای ارزیابی شیوع ویروس هپاتیت b در نمونه های سرمی افراد همودیالیزی است. مواد و روش ها: این پژوهش به صورت مقطعی-توصیفی بر روی سرم 136 بیمار مراجعه کننده به 3 مرکز همودیالیز بیمارستان مصطفی خمینی (53 نمونه)، بیمارستان چمران (54 نمونه) و بیمارستان عرفان (31 نمونه) انجام شد. پس از استخراج dna با استفاده از 6 پرایمر اختصاصی ژن hbsag شرایط واکنش و غلظت مواد برای تشخیص hbv بهینه سازی گردید. همچنین محصولات واکنش با استفاده از روش ژل الکتروفورز با استفاده از اتیدیوم بروماید و سایبرگرین ارزیابی گردید. یافته ها: در این مطالعه حساسیت روش بهینه سازی شده lamp، 4 ذره ویروسی بود. همچنین این روش ویژگی بسیار بالایی داشت. از افراد مراجعه کننده به بیمارستان مصطفی خمینی 13 مورد به وسیله تکنیک lamp و 7 مورد به وسیله pcr و از افراد مراجعه کننده به بیمارستان چمران 4 مورد به وسیله تکنیک lamp و 2 مورد به وسیله pcr مثبت بودند. اما میزان شناسایی ویروس در افراد مراجعه کننده به بیمارستان عرفان با استفاده از هر دو تکنیک یکسان (2 مورد) بود. نتیجه گیری: برای شناسایی ویروس هپاتیت b، روش lamp در مقایسه با روش pcr معمولی بسیار سریع تر، مقرون به صرفه تر و دقیق تر است.