شناسایی نشانگرهای مولکولی پیوسته با ژن(های) مقاومت به نماتد مولد سیست چغندرقند
چکیده
با توجه به اهمیت وگستردگی نماتد مولد سیست چغندرقند (heterodera schachtii schmidt) در جهان و به منظور جلوگیری از کاهش قابل توجه محصول ریشه و قند ناشی از این نماتد تلاشهای زیادی صورت میگیرد و مناسبترین روش مدیریت آن اصلاح ارقام مقاوم میباشد. گونههای وحشی گروهprocumbentes در جنسbeta بهدلیل داشتن ژنهای مقاومت به بیماریهای مختلف چغندرقند ازجمله مقاومت به نماتد اهمیت زیادی دارند. برای شناسایی نشانگرهای مولکولی dna پیوسته با ژن(های) مقاومت به نماتد مولد سیست چغندرقند از آغازگرهای 10 نوکلئوتیدی و توالیهای اختصاصی استفاده شد. برای این منظور، در ابتدا جمعیتهای درحال تفکیک برای ژن(های) مقاومت به نماتد انتخاب گردیدند. پس از کشت بذر، نشاء این جمعیتها با حدود 1000 لارو نماتد در چند نوبت، تلقیح شدند. گیاهان مقاوم (با کمتر از 10 سیست) و گیاهان حساس(بابیشتر از10 سیست) شناسایی و به دو گروه تقسیم شدند. در مرحله بعد با استفاده از آغازگرهای انتخابی مانند: op-x-02 ,op-x-15 ,op-g-02, op-d-13, op-b-11,op-y-10 و الیگونوکلئوتیدهای tgaacacctttcaaat، cgtaagagactatga و 100 آغازگر از کیتهای شرکت اپرون، آزمون pcr، انگشتنگاری نمونهها و مقایسه الگوی نوارهای dnaی دوگروه، انجام شد بین مقاومت در گیاه و حضور نوار خاصی از توالی dna تکثیر شده، با نشانگر sat-121، 64/66 درصد پیوستگی و هم چنین بین مقاومت در گیاه و حضور نوار خاصی از توالیdna تکثیر شده، با نشانگر op-d-13، 91/66 درصد پیوستگی مشاهده شد که این دو نشانگر میتوانند در غربال ژنوتیپهای مقاوم در شرایط آزمایشگاهی استفاده شوند.