تشخیص و آنتی بیوگرام استافیلوکوکوس ارئوس در نمونه های شیر غیر پاستوریزه استان تهران به روش multiplex pcr و مقایسه با کشت میکروبی
چکیده
باکتری استافیلوکوکوس ارئوس از شایع ترین باکتری های عامل ورم پستان می باشد که جهت تشخیص تعداد کم آن در شیر نیاز به روش های حساس می باشد. در این مطالعه روش از واکنش زنجیره ای پلی مراز برای تشخیص ژن های تولید کننده توکسین های sea، seb، sec که مختص گونه ارئوس بوده و همچنین ژن حراست شده s rrna23 که در تمام استافیلوکوک ها مشترک می باشد، استفاده شده است. در نهایت نتایج حاصل از تشخیص ملکولی با روش مرسوم کشت مورد مقایسه قرار گرفته است. به دلیل سختی دیواره باکتری استافیلوکوکوس و عدم تأثیر آنزیم های لایزوزیم، پروتئناز k و موتیلایزین، از روش ازت مایع جهت تجزیه دیواره باکتری استفاده گردید. تعداد 48 نمونه شیرغیر پاستوریزه از دامداری های حومه استان تهران تهیه و بعد از انجام pcr و کشت بر روی محیط آگار خون دار تعداد 4 نمونه مثبت تشخیص داده شد. نتایج حاصل از آنتی بیوگرام نشان داد که سیپروفلوکساسین، ریفامپین و جنتامایسن بهترین آنتی بیوتیک های انتخابی در درمان اورام پستانی ناشی از استافیلوکوکوس طلائی می باشد. حساسیت روش ملکولی با تعداد 10 باکتری در هر میلی لیتر از محیط کشت در مدت زمان کوتاهی بدست آمد در حالیکه در روش کشت، تعداد 100 باکتری بعد از مدت 48 ساعت قابل تشخیص بود. بیان کننده آن است که روش ملکولی در مقایسه با روش های مرسوم حساس و بسیار سریع می باشد.