بررسی میزان بیان تعدادی از ژن‌های دخیل در سرطان در چند رده سلول سرطانی مختلف به روش rt-pcr
چکیده
چکیده فرم تغییریافته و یا جهشیافته ژنها یا همان پروتو انکوژنها، مسئول ترویج رشد و تکثیر کنترلنشده سلولی میباشند. تجمع جهش در ژن‌های مختلف و خاص، در طول زمان منجر به سرطان میشود. الگوی بیان ژن (امضا مولکولی)، برای هر کلاس از سلولهای توموری اختصاصی است. این مقاله آخرین روش نظارت بر بیان یک پانل از ژن‌های خاص سرطانی را شرح میدهد. روش real-time pcr براساس عملکرد کمی رنگ sybr green، بهطور وسیعی برای پروفایل ژن استفاده میشود. این روش آسان و مقرون بهصرفه است و تنها بر روی ژن‌های مورد نظر تمرکز میکند. در این مطالعه میزان بیان ژن‌های موردنظر ما در پنج رده سلولهای سرطانی انسانی به طور کمی اندازهگیری شد. ما ژن بتا-اکتین را بهعنوان ژن مرجع در نظر گرفتیم. سلولها لیز شدند و mrna با استفاده از کیت rna purification و ستونهایspin qiagen rneasy استخراج گردید. رشته اول cdna با استفاده از کیتhigh capacity cdna reverse transcription سنتز و میزان بیان ژنها به وسیله دستگاهreal-timepcr ab step one plus اندازه گیری شد.به طور خلاصه بیان ژن p53 در هر دو رده سلول سرطان پستان، mcf7 و t47-d و سرطان ریه، a549 بالا بود. بیان src در رده سرطان پروستات، pc3 بالاتر بود. همینطور skov3 (سرطان تخمدان) بیان بالای ژن her-2 را نشان داد. نتایج به وضوح نشان میدهد که الگوی بیان این پانل از ژنها، در هر رده سلولی تقریباً منحصر به فرد است .