مقاله

بیان پروتئین نوترکیب استرپتولیزین o استرپتوکک پیوژن در باکتری اشریشیاکلی

حمید ابطحی، hamid abtahi قاسم مسیبی، ghasem mosayebi علی هاتف سلیمانیان، ali hatef soleimanian

دانلود متن کاملرایگان، با حساب کاربری؛ ثبت نام با گوگل چند ثانیه است

چکیده

مقدمه: استرپتولیزین o از جمله پروتئین های ترشحی استرپتوکک پیوژن بوده که دارای قدرت آنتی ژنیک می باشد. امروزه با ردیابی آنتی بادی های ضد این پروتئین روند عفونت ناشی از این باکتری پی گیری می شود. تاکنون تولید نوترکیب این پروتئین با استفاده از ناقلین بیانی دارای پروتئین الحاقی صورت گرفته است. در این تحقیق سعی گردیده تا تولید پروتئین با استفاده از ناقلین بدون پروتئین الحاقی انجام پذیرد. روش کار: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاصی و استفاده از روش pcr، ژن استرپتولیزینo از استرپتوکک پیوژن تکثیر گردید. پس از تخلیص، ژن فوق در ناقل پلاسمیدی pet28a جهت بیان کلون گردید. سپس ساختار پلاسمیدی pet28a-slo وارد باکتری اشریشیا کلی سویه bl21- de3-plyss شد. تولید پروتئین با القا توسط iptg و بهینه سازی شرایط صورت گرفت. پروتئین نوترکیب با استفاده از کیتni-nta خالص و میزان پروتئین با استفاده از روش براد فورد اندازه گیری شد. آزمایش وسترن بلات برای تایید پروتئین نوترکیب انجام شد. نتایج: ترادف نوکلئوتیدی ژن تکثیر شده توسط روش pcr با ژن استرپتولیزینo استرپتوکک پیوژن یکسان بود. تولید پروتئین نوترکیب استرپتولیزینo با القا پلاسمید pet28a-slo توسط iptg انجام گردید. تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی و با استفاده از کیت ni-nta انجام شد. میزان پروتئین خالص شده برابر 100 میکرو گرم در میلی لیتر به دست آمد. سرم موش واجد آنتی استرپتولیزین o در روش وسترن بلات با پروتئین تولید شده واکنش داد. نتیجه گیری: تولید پروتئین نوترکیب استرپتولیزین o بدون استفاده از پروتئین الحاقی در میزبان اشریشیا کلی نیز امکان پذیر است. پروتئین تولید شده خاصیت آنتی ژنیک خود را به خوبی حفظ می کند. بنابر این می توان از آن در تشخیص آنتی بادی ضد استرپتولیزین o در بیماران مبتلا به عفونت استرپتوککی استفاده کرد.

اسناد مشابه

  • تولید پروتئین نوترکیب β-NGF در باکتری اشریشیاکلی با استفاده از شیره خرما

    مقاله۲۰۱۵زیست فناوریفرشید جابری انصاری، زهرا حاجی حسن، حسن جلیلی

    تولید پروتئین های نوترکیب بطورمثال β-NGF با استفاده از میزبان های پروکاریوتی موضوع بسیاری ازمطالعات چنددهه اخیر می باشد. با وجود اینکه محیط های کشت باکتریایی نسبت به محیط کشتهای مخصوص سلول های یوکاریوتی ارزان تر و مقرون به صرفه تر می باشند اما وقتی همین محیط ها در مقیاس های صنعتی

  • تولید پروتئین نوترکیب β-ngf در باکتری اشریشیاکلی با استفاده از شیره خرما

    مقالهزیست فناوریفرشید جابری انصاری، دانشجوی دانشگاه تهران زهرا حاجی حسن، هیات علمی دانشگاه تهران حسن جلیلی، هیات علمی دانشگاه تهران

    تولید پروتئین های نوترکیب بطورمثال β-ngf با استفاده از میزبان های پروکاریوتی موضوع بسیاری ازمطالعات چنددهه اخیر می باشد. با وجود اینکه محیط های کشت باکتریایی نسبت به محیط کشتهای مخصوص سلول های یوکاریوتی ارزان تر و مقرون به صرفه تر می باشند اما وقتی همین محیط ها در مقیاس های صنعتی

  • تولید پروتئین نوترکیب β-ngf در باکتری اشریشیاکلی با استفاده از شیره خرما **article uncorrected proof**

    مقاله۲۰۱۵زیست فناوری دانشگاه تربیت مدرسفرشید جابری انصاری، زهرا حاجی حسن، حسن جلیلی

    تولید پروتئین های نوترکیب بطورمثال β-ngf با استفاده از میزبان های پروکاریوتی موضوع بسیاری ازمطالعات چنددهه اخیر می باشد. با وجود اینکه محیط های کشت باکتریایی نسبت به محیط کشتهای مخصوص سلول های یوکاریوتی ارزان تر و مقرون به صرفه تر می باشند اما وقتی همین محیط ها در مقیاس های صنعتی

  • طراحی روش الایزا جهت سنجش آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o بر پایه پروتئین نوترکیب استرپتولیزین- o

    مقالهکومشقاسم مسیبی، ghasem mosayebi molecular and medicine research center and department of immunology and microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iran1- دانشگاه علوم پزشکی اراک، دانشکده پزشکی و عضو مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی حمید ابطحی، hameid abtahi molecular and medicine research center and department of immunology and microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iran1- دانشگاه علوم پزشکی اراک، دانشکده پزشکی و عضو مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی علی قضاوی، ali ghazavi molecular and medicine research center and department of immunology and microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iran2- دانشگاه علوم پزشکی اراک، دانشکده پزشکی و عضو مرکز تحقیقات عفونی، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی نادر زرین فر

    سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه a اصلی ترین عامل عفونت های گوش و حلق و بینی می باشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت می شود. اندازه گیری آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o به عنوان یک مارکر در تشخیص این عف

  • طراحی روش الایزا جهت سنجش آنتی‌بادی ضد استرپتولیزین- O بر پایه پروتئین نوترکیب استرپتولیزین- O

    مقاله۲۰۱۲کومشابطحی, حمید، خاکی, محسن، زرین فر, نادر، قضاوی, علی

    سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه A اصلی‌ترین عامل عفونت‌های گوش و حلق و بینی می‌باشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت می‌شود. اندازه‌گیری آنتی‌بادی ضد استرپتولیزین- O به عنوان یک مارکر در تشخیص این عف

  • ساخت پلاسمید بیان‌کننده پروتئین نوترکیب تحت القای حرارتی در اشریشیاکلی

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیfariba ataei، m.sc. graduate, national institute for genetic engineering and biotechnology hosein ghanbarian، m.sc. graduate, medical biotechnology department, medical science faculty, tarbiat modares university, tehran, iran ali reza zomorodipour، faculty member, national institate for genetic engineering and biotechnology bagher yakhchali

    هدف: در بیان عامل تحریک کننده رده گرانولوسیت- ماکروفاژ انسانی (hgm-csf)، در اشریشیاکلی تحت القای حرارتی، بر پایه پلاسمید pbc(sk)، که اختلاف آنها در حضور یا عدم حضور توالی خاتمه دهنده نسخه برداری در پایین دست توالی کدکننده است پروتئین نوترکیب، ساخته شد. مواد و روش ها: دو پلاسمید ب