راه اندازی سنجش ایمنی (ria) برای اندازه گیری استرادیول در کلینیک
چکیده
اندازه گیری استرادیول در سرم یا پلاسما از اهمیت فراوانی در کنترل فعالیت تخمدانها برخوردار است . در ایران، سالیانه دهها نوع ازکیتهای متفاوت که در آنها از نشانهایی با پرتوگاما استفاده می شود را وارد می کنیم که طبق آمار رسمی حداقل مبلغ دو میلیون دلار ارز از کشور خارج می سازد. در این مطالعه با استفاده از استرادیول نشاندار شده با تریتیوم رادیوایمنواسی برای اندازه گیری این مولکول در سرم افراد طراحی شد. سه آنتی بادی علیه مشتقات مختلف استرادیول بر روی کربنهای شماره c17,c8,c3 در آزمایشگاه تهیه شد. آنتی بادی با روش دوز پائین و تزریق زیر پوستی بدست آمد. نتایج بررسی ها نشان داد که، آنتی بادی حاصل از مشتق c6 از ویژگی بیشتری برخوردار است و با استریول و استرون بترتیب 1 درصد و 6 درصد واکنش متقاطع از خود نشان می دهد. حساسیت این سنجش در حد 5ˆ2 پیکوگرم بر لوله با روش غیر رقابتی (افزایش آنتی ژن نشاندار 15 ساعت پس از افزایش آنتی بادی و آنتی ژن سرد) می باشد. استرادیول موجود در نمونه با یک مرحله اتر تخلیص گردید. دقت سنجش در سه محدوده مورد آزمایش قرار گرفت (کم = 100pg/ml، متوسط = 200pg/ml، زیاد= 500pg/ml) . مقدار بازیافت استرادیول اضافه شده به سرم عاری از هورمون بین 25ˆ96 الی 5ˆ100 درصد با cv کمتر از 8ˆ11 درصد می باشد. دقت سنجش در بین و میان آزمایشات متعدد (7 آزمایش و هر بار 8 تکرار) بررسی شد و نتایج قابل قبول می باشد. ضریب همبستگی بین این روش و کیتهای تجارتی برای 14 نمونه بالینی محاسبه گردید و نتایج، حاکی از همبستگی بسیار خوب در حدودr=0/98 می باشد . مقدار نرمال در آقایان 4ˆ23 + 00ˆ53 و برای خانمهای طبیعی در فازهای مختلف دوران قاعدگی دوران فولیکولی pg/ml 2ˆ22 + 60 ˆ 79، در اواسط سیکل pg/ml 2ˆ79 + 0ˆ255 و در دوران لوتال pg/ml 1ˆ45 + 8ˆ155 محاسبه گردید. با استناد بر نتایج حاصل پیشنهاد می شود که روش فوق جایگزین کیتهای وارداتی گردد.