استفاده از وسترن بلاتینگ به منظور مقایسه ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک با گلیکوپروتئین نوترکیب d ویروس
چکیده
ویروس هرپس سیمپلکس تیپ یک (hsv-1) ، ویروسی انولوپ دار با dna دو رشته ای خطی است که بیماری های مختلفی در انسان ایجاد می کند که از بیماری های خفیف در بسیاری از بیماران تا بیماری های تهدیدکننده زندگی در نوزادان و افراد با ایمنی سازشکار دیده می شود. این ویروس حداقل 11 گلیکوپروتئین را کد می کند که گلیکوپروتئین d نقش مهمی درعفونت زایی و پاتوژنز ویروس دارد. دراین پژوهش ، ابتدا hsv-1 تکثیر شد و سپس رقت های متوالی از آن تهیه شد و به یاخته های کلیه گاو bk اضافه شد و آخرین رقت ویروس که باعث ایجاد اثرات سیتوپاتیک در یاخته های تلقیح شده گردیده بود، جمع آوری گردید. این ویروسها برای تولید آنتی سرم در خرگوش استفاده شد. همچنین آزمایش vnt(آزمایش خنثی سازی ویروس)برای تشخیص و اندازه گیری آنتی بادی های hsv-1 در 100 نمونه سرمی که از افراد مشکوک جمع آوری شده بود، استفاده شد. به منظور انجام آزمایش وسترن بلاتینگ ، ویروس با شیب غلظت سوکروز سانتریفوژ شد و در آزمایش به کار رفت. برای مقایسه وسترن بلاتینگ با vnt ، ویروسی که در یاخته های هلا تهیه شده بود، استفاده شد. بنابراین برای تعدادی از سرم هایی که در وسترن بلاتینگ ویروس کامل مثبت بودند، با همان رقت ها، آزمایش وسترن بلاتینگ با گلیکوپروتئین نوترکیب d تولید شده دریاخته sf9 انجام شد که نتایج یکسانی را نشان داد.
