بکارگیری روش الیزا و مقایسه آن با روش خنثی سازی ویروس به منظور اندازه گیری عیار igm ضد ویروس سرخک
چکیده
ویروس سرخک از اعضا جنس موربیلی ویروس در خانواده پارامیکسو ویریده است . این ویروس عامل بیماری سرخک در انسان است و هیچ مخزن حیوانی ندارد. بیماری سرخک یکی از واگیردارترین بیماری ویروسی است که ویروس آن معمولا باعث آلودگی اطفال می شود. ویروس از طریق ذرات معلق در هوا پخش شده و راه اصلی ورود به بدن، بخش فوقانی دستگاه تنفس ، چشم و حتی cns می گردد. دوره بیماری حدود یک هفته است و علائم آن معمولا سخت می باشد. هر چند بیماری سرخک به تنهایی کشنده نیست اما به علت ایجاد عوارض متعدد بویژه برونشیت و انواع انسفالیت یکی از عوامل مرگ و میر کودکان است . علی رغم تجویز گسترده واکسن ضد این بیماری در جهان. هنوز هم درصد افراد حساس و مرگ ناشی از این بیماری قابل توجه است . کشور جمهوری اسلامی ایران نزدیک به دو هه است که بطور مستمر این واکسن را در اطفال حدود یکسال مصرف می نماید، ولی با کمال تاسف موارد بیماری در چند سال اخیر قابل توجه بوده است . به همین منظور بررسی وجود igm ضد ویروس می تواند معیار درستی برای تشخیص بیماری و کارآئی واکسن باشد. لذا در این پژوهش روش الیزا برای اندازه گیری igm اختصاصی ویروس سرخک راه اندازی شد. برای انجام این روش ، ابتدا ملکول igm انسانی در مراحل مختلف تهیه و خالص سازی شد و سپس آنتی سرم در خرگوش تهیه گشت . با استفاده از روشهای مختلف ، آنتی سرم خالص و با آنزیم پراکسید ازکونژوگه شد. برای تهیه آنتی ژن نیز از تلقیح ویروس سرخک به رده سلولی ورو و خالص سازی نسبی آن استفاده و بوسیله این محصولات ، روش الیزای غیرمستقیم طراحی شد و 100 نمونه سرم اطفال 9-18 ماهه که واکسن سرخک را دریافت نموده بودند، مورد ارزیابی قرار گرفت . همچنین روش sn نیز برای این تعداد نمونه اعمال شد. با مقایسه روش الیزای طراحی شده در این پژوهش و sn مشخص گردید، این دو آزمایش ارتباط قوی و مناسبی با هم ندارند. از طرفی با مقایسه الیزای طراحی شده در این پژوهش وکیت الیزای وارداتی، میزان حساسیت و ویژگی آن به ترتیب 98/9 و 100 درصد بوده است .