تولید آنتی ژن حفاظت کننده باسیلوس آنتراسیس با استفاده از تکنیک بیان پروتئین های نوترکیب
چکیده
سیاه زخم توسط باکتری گرم مثبت و اسپوردار باسیلوس آنتراسیس، ایجاد می شود. سم سیاه زخم از سه پروتئین آنتی ژن حفاظتی(pa)، فاکتور کشنده(lf) و فاکتور ادم(ef)، ساخته می شود. واکسن های کنونی علیه سیاه زخم،از pa بعنوان جزء اصلی خود استفاده می کنند، چونکه pa ایمنی حفاظتی ایجاد می کند. ایمنی زایی با این واکسن ها ممکنست که اثرات جانبی را القا کند و به منظور حفظ ایمنی، نیاز به چندین دوز یادآور می باشد. بنابراین به یک واکسن پیشرفته، ایمن، موثر و ارزان علیه سیاه زخم نیاز است. هدف از این تحقیق کلون و بیان ژن آنتی ژن حفاظتی باسیلوس آنتراسیس بصورت پروتئین فیوژن با mbp در باکتری e.coli بود. ژن آنتی ژن حفاظتی در وکتور pmal-c2x کلون گردید و این ساختار در سویه میزبان e.coli dh5∝ بیان شد. بیان آنتی ژن توسط روش های sds-page و وسترن بلات نشان داده شد. نتایج این تحقیق نشان می دهد که پلاسمید نوترکیب pmal-c2x، آنتی ژن حفاظتی را بصورت کارا بیان می کند و می توان از آن بعنوان یک حامل مناسب جهت تولید آنتی ژن pa به منظور استفاده در کیت های تشخیصی و نیز واکسیناسیون استفاده کرد.