ژنوتایپینگ گونه های عامل لیشمانیوز جلدی انسان در شهرستان بم با استفاده از روش rflp
چکیده
خلاصه فارسی ژنوتیپینگ گونه های عامل لیشمانیوز جلدی انسان در شهرستان بم با روش rflp نگارنده: گلناز حمزه لیشمانیوز جلدی بیماری زئونوزی بوده که عامل آن لیشمانیا ماژور و لیشمانیا تروپیکا می باشد که این بیماری باعث ایجاد زخم های پوستی می شود. روش هایی از قبیل کشت در محیط اختصاصی، گسترش مستقیم، بیوشیمیایی(ایزوآنزیم)، ایمونولوژیک و ژنتیک ملکولی از جمله تکنیک های تشخیصی برای این تک یاخته می باشند. در این مطالعه به منظور تشخیص گونه های لیشمانیا درشهرستان بم یکی از کانون های لیشمانیوز جلدی در جنوب شرق ایران از روش rflp استفاده شده است. بدین منظور تعداد 83 نمونه بالینی از بیماران مراجعه کننده به مراکز درمانی شهرستان بم جمع آوری گردید. پس از نمونه گیری از محل ضایعه، خون و پوسته های زخم روی کاغذهای صافی واتمن قرار داده شد. پس از خشک شدن، نمونه ها به آزمایشگاه منتقل شد. اسید نوکلئیک نمونه ها، با استفاده از کیت استخراج dna (ساخت شرکتaccuprep , bioneer کره جنوبی) جدا و در دمای 20- درجه سانتی گراد تا زمان انجام آزمایش نگهداری شد. ناحیه مشترک 400 جفت بازی در جنس لیشمانیا (its1) با استفاده از پرایمرهای مشترک جنس لیشمانیا آمپلی فای شده و در ادامه با آنزیم haeiii آمپلیکون هضم شده و الگوی شکسته شدن آنها در مقایسه با سوش های رفرانس مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج حاصله نشان داد که تمامی نمونه های اخذ شده از شهرستان بم گونه لیشمانیا تروپیکا می باشند. در مطالعه کنونی روش pcr برای آمپلیفای کردن صحیح dna لیشمانیا در روش های بیولوژی به کار برده شد. این امر قابل تفسیر می باشد چرا که لیشمانیوز پوستی ایجاد شده توسط لیشمانیا تروپیکا ناشی از مخازن شهری انگل (سگ و سگ سانان) است. نتایج به دست آمده با توجه به نوع زخم و تاریخچه بیماران که از مناطق شهری مراجعه نموده قابل تفسیر می باشد. ضمن آنکه روش rflp تکنیکی با حساسیت و ویژگی و سرعت بالا بوده و می تواند در یک روز کاری علاوه بر تشخیص لیشمانیوز، نوع گونه را مشخص نماید