پایان‌نامه

تولید یک پروتئین کایمریک، متشکل از نواحی اتصال دهنده نروتوکسین بوتولینوم تیپ های a, b,e و مقایسه پتانسیل ایمنی زائی آن با شش نوع پپتید ایمنی زا در مدل حیوانی موشی

فیروز ابراهیمی

چکیده

نوروتوکسین های بوتولینوم، پروتئین های بسیار سمی هستند که از یک زنجیره سنگین (100کیلو دالتون) و یک زنجیره سبک (50 کیلودالتون) تشکیل شده اند. دارای هفت سروتیپ (a-g) و مسئول سندروم بوتولیسم هستند. در این مطالعه، پلی پپتید هایی به طول 54، 45 و 48 اسید آمینه، به ترتیب از سروتیپ های a, b, e نوروتوکسین های بوتولینوم انتخاب و با استفاده از یک لینکر آب گریز به هم متصل و پس از بررسی های بیوانفورماتیک و بهینه سازی ژن، پروتئین کایمر حاصل در میزبان اشرشیاکلی بیان شد. پروتئین کایمر، پس از خالص سازی با روش الیزا و وسترن بلات تایید شد. برای ارزیابی توان مصونیت زایی، پروتئین کایمر به گروه های موشی تزریق شد و تولید آنتی بادی و مصونیت زایی آن بررسی شد. نتایج، نشان دهنده آنتی ژنیسیتی و مصونیت زایی آن بود. همچنین، این پروتئین به مرغ تزریق شد. آنتی بادی مرغی تولید شده در مرغ، از زرده تخم مرغ ها تخلیص شد و توان خنثی سازی آن به شکل خوراکی در مدل موش مطالعه شد. نتایج، نشان داد که این آنتی بادی، توان خنثی سازی نوروتوکسین های بوتولینوم را ندارد. همچنین، در این تحقیق، برای هر یک از نوروتوکسین های بوتولینوم، دو پپتید اپی توپی ( به استثنای تیپ e که یک اپی توپ انتخاب شد) به طول 19 اسید آمینه، انتخاب شد و به تنهایی و یا به همراه پپتید سیناپتوتاگمین ( به عنوان گیرنده نورروتوکسین های بوتولینوم) به گرو های موشی تزریق شدند. همه پپتید ها به غیر از پپتید تیپ e توانستند در موش، آنتی بادی تولید کنند، اما نتوانستند اثر نوروتوکسین های فعال را خنثی نمایند. تزریق پپتید سیناپتوتاگمین به همراه پروتئین کایمر و پپتیدهای تیپ a وb اثرات متفاوتی در پاسخ ایمنی موش به آنتی ژن های مذکور داشت. پاسخ ایمنی موش ها به پپتید های اپی توپی تیپ های aو b در حضور این پپتید گیرنده، سرکوب شده ولی در مورد پروتئین کایمر، تحریک شد. نتایج این تحقیقات نشان دادکه پروتئین کایمر، از خاصیت آنتی ژنی و توان مصون سازی همزمان علیه سه سروتیپ را دارد. اما، آنتی بادی مرغی این توان را ندارد. همچنین پپتید های آنتی ژنی توان ایمنی زایی را ندارند.

اساتید راهنما و مشاور

لطیف موسوی گرگری، محمدجواد رسایی، ولی الله بابایی پور

اسناد مشابه

  • بررسی ایمنی زایی نانوذرات کیتوسان حاوی پروتئین نوترکیب ناحیه اتصال دهنده نوروتوکسین بوتولینوم تیپ e در موش

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانمحمدجواد باقری پور، mohamadjavad bagheripour msc in medical microbiology, biological research center, faculty of basic sciences, imam hossein university, tehran, iranکارشناس ارشد میکروب شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران فیروز ابراهیمی، firouz ebrahimi assistant professor, biological research center, faculty of basic sciences, imam hossein university, tehran, iranتهران: دانشگاه جامع امام حسین (ع)، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، مرکز تحقیقات زیست شناسی عباس حاجی زاده، abbas hajizadeh msc in cellular & molecular biology, biological research center, faculty of basic sciences, imam hossein university, tehran, iranکارشناس ارشد زیست شناسی سلولی و مولکولی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران شهرام نظریان

    چکیده سابقه و هدف: نوروتوکسین های باکتری کلستریدیوم بوتولینوم از قوی ترین سموم شناخته شده می باشند که سبب بروز سندروم خطرناک بوتولیسم در انسان و حیوان می شوند. تحقیقات نشان داده است که زیر واحد اتصالی این سم دارای خاصیت ایمنی زایی بوده و میتواند در تهیه واکسن نوترکیب مورد استفاده

  • امتزاج و همسانه سازی نواحی اتصال دهنده نوروتوکسین های بوتولینوم تیپ aوb

    مقالهgenetics in the 3rd millenniumبهرام حمیدی، bahram hamidi فیروز ابراهیمی، firouz ebrahimi عباس حاجی زاده، abbas hajizadeh

    نوروتوکسین های بوتولینوم (bonts) توکسین های باکتریایی نیرومندی هستند که در غلظت های فمتومولار با جلوگیری از آزاد شدن انتقال دهنده عصبی استیل کولین سبب ایجاد فلج عضلانی شل می گردند. هر نوروتوکسین متشکل از یک زنجیره سبک 50 کیلودالتونی و یک زنجیره سنگین100 کیلو دالتونی است. ناحیه ان