استخراج و خالص سازی پپتید های ضد میکروبی از ترشحات پوستی قورباغه مردابی (rana ridibunda) بومی استان خراسان رضوی
چکیده
استفاده روزافزون از آنتی بیوتیک ها برای درمان انواع بیماری های عفونی زمینه را برای ایجاد سویه های مقاوم فراهم کرده است به طوری که امروزه برخی از سویه های باکتریایی تحت تأثیر هیچ یک از آنتی بیوتیک های رایج امروزی قرار نمی گیرند؛ بنابراین امروزه باید به دنبال جایگزینی مناسب برای این ترکیبات بود تا بتوان با این مشکل مقابله کرد. در این بین مشخص شده است که ترشحات پوستی دوزیستان سرشار از ترکیباتی با ماهیت پپتیدی است که اثرات قابل توجهی علیه انواع میکروب ها دارند. در این تحقیق با استفاده از ترشحات پوستی قورباغه مردابی بومی خراسان سعی بر آن داریم تا پپتید های جدید با اثرات ضد میکروبی را جداسازی کنیم. در این مطالعه دو پپتید ضد میکروبی جدید temporin-ra و temporin-rb با استفاده از کروماتوگرافی فاز معکوس از ترشحات پوستی قورباغه مردابی (rana ridibunda) خالص سازی و شناسایی شد. پپتید های جدید temporin-ra و temporin-rb به ترتیب از 14 و 12 اسید آمینه ساخته شده اند. نتایج ما نشان داد که این دو پپتید اثر مهاری بر روی انواع باکتری گرم مثبت و گرم منفی به ویژه باکتری های مقاوم بیمارستانی مانند staphylococcus aureus و streptococcus agalactiae را دارند. توالی و وزن مولکولی این دو پپتید با استفاده از اسپکتروسکوپی جرمی تعیین شد. پپتید temporin-ra دارای وزن مولکولی 1/1585 دالتون و پپتید temporin-rb دارای وزن مولکولی 5/1242 دالتون است. سلول های خونی انسان به خوبی این دو پپتید را تحمل می کنند به طوری که در غلظت ?g/ml60، پپتید temporin-ra ، تنها 3/1 درصد و پپتید temporin-rb ، 1/1 درصد همولیز نشان دادند. مقدار حداقل غلظت مهاری (mic) این دو پپتید بسیار مناسب است و در غلظت های پایین خاصیت میکروب کشی وسیعی دارند. به دلیل فعالیت ضد میکروبی با طیف وسیع و خاصیت همولیتیک پایین، احتمالاً بتوان از این دو پپتید جدید ، در درمان عفونت های موضعی استفاده کرد.