ژنوتایپینگ سویه های e.coli تولید کننده آنزیم های بتالاکتاماز ( amp-c، ctx-m، shv و tem ) با rep-pcr
چکیده
مقدمه: آنزیم های بتالاکتاماز tem، ctx-m، shv و amp-c از آنزیم هایی هستند که بر روی عناصر قابل انتقال واقع شده اند،esbl ها بتالاکتامازهای هیدرولیز کننده پنی سیلین ها، سفالوسپورینهای وسیع الطیف و آزترئونام می باشند. آنزیم amp-c بر روی کروموزوم نیز واقع شده است. هدف از این بررسی تعیین فراوانی اشریشیاکلی های تولیدکننده esbl وارزیابی مولکولی بتالاکتامازهای tem، ctx-m، shv و amp-c توسط pcr و بررسی ژنوتایپینگ با روش rep-pcr در سویه های e.coli بود. مواد و روش ها: تعداد 200 سویه اشریشیاکلی از نمونه های کلینیکی جدا شد و حساسیت آنتی بیوتیکی سویه ها با روش disk diffusion و تولید آنزیم های esbl با استفاده از روش disk combined تعیین گردید. mic سفتازیدیم و سفوتاکسیم همراه با کلاولانیک اسید و به تنهایی با استفاده از روش agar dilution مشخص شد. در نهایت حضور ژن های blatem،blactx-m ، blashv و blaamp-c با استفاده از پرایمرهای اختصاصی توسط pcr شناسایی و با استفاده از rep-pcr ژنوتایپینگ سویه ها انجام گردید. نتایج: میزان مقاومت دارویی سویه های جدا شده نسبت به 14 آنتی بیوتیک بدست آمد. با آزمون combined disk 155 سویه (5/77%) تولیدکننده آنزیم esbl بودند. 90 سویه دارای miccaz ? 16و 144 micctx ? 4 بودند. فراوانی آنزیم های tem، ctx-m، shv و amp-c به ترتیب 1/54، 4/57، 9/61 و 5/2 درصد بدست آمد. و نتایج rep-pcr شباهت ژنوتیپی سویه ها را نشان داد. نتیجه گیری : نتایج آزمایشات فنوتیپی نشان می دهد که تولید آنزیم های بتالاکتاماز esbl در سویه های مورد مطالعه بالا (5/77%) است و روش pcr فراوانی بالایی از آنزیم های مورد مطالعه را نشان داد. نتایج rep-pcr نیز نشان داد سویه هایی که حاوی آنزیم های بتالاکتامازی یکسان هستند از نظر ژنوتیپی شباهت زیادی با هم دارند. پیشنهاد می شود برای جلوگیری از شیوع سویه های اشریشیاکلی تولید کننده esbl مراقبت های های دقیق پزشکی در کشور صورت پذیرد.