پایان‌نامه

ساب کلونینگ ژن آنزیم سوپراکسید دیسموتاز 1 انسانی(hsod1) در سلول های استرومایی مغز استخوان موش صحرایی و ارزیابی بیان وفعالیت آن در محیط کشت

محسن عابدی

دانلود متن کاملرایگان، با حساب کاربری؛ ثبت نام با گوگل چند ثانیه است

چکیده

سلول های استرومایی مغز استخوان (bmscs) نوعی سلول های بنیادی بالغ با قدرت تمایز بالا هستند. bmscs می توانند به سلول هایی با منشأ مزودرمی و غیرمزودرمی تمایز پیدا کنند که با توجه به قابلیت دسترسی این سلول ها منبع مناسبی از سلول های بنیادی بالغ جهت تولید سلول های پایدار و سلول درمانی می باشند. در مطالعه حاضر این سلول ها با استفاده از ژن آنزیم سوپراکسید دیسموتاز1 انسانی ترانسفکت شدند و در ادامه میزان بیان پروتئین و همچنین میزان فعالیت آنزیم سنجیده شده است.پرایمرهای اختصاصی دارای توالی های آنزیمی hindiii و xhoi برای ژن hsod1 از پلاسمید pincy-hsod1 طراحی و تکثیر و تایید این ژن انجام شد. قطعه های تکثیر شده توسط pcr، در کلونینگ وکتور ترشحی psectag2/hygrob ساب کلون شدند و با روش های کلونی-pcr و هضم آنزیمی تایید گردیدند. در ادامه برای انجام کارهای سلولی تحت شرایط استریل سلولهای bmsc از استخوان ران موش های صحرایی بالغ استخراج شد.سپس با استفاده از روش های ایمنو سایتوشیمی وبا استفاده از آنتی بادی فیبرونکتین و cd45 ماهیت استرومایی این سلول ها تایید شد. برای انجام ترانسفکشن پاساژ سوم این سلول ها را با استفاده از معرف توربوفکت در معرض وکتور نوترکیب ساخته شده قرا می دهیم.با روش های rt-pcr و real time pcr به صورت کمی بیان ژن ارزیابی شد و در مرحله بعد با استفاده از آنتی بادی منوکلونال و اختصاصی انسانی بیان در سطح پروتئین با روش وسترن بلات انجام شد.در نهایت برای ارزیابی فعالیت آنزیمی با کمک کیت ارزیابی آنزیم sod فعایت آنزیم سنجیده شد که فعالیت آنزیمی 0.0402 به عنوان درصد مهار آنزیم، با توجه به دستورالعمل موجود در کیت حاصل شد. : با توجه به کاربرد متعدد سلول های بنیادی می توان با استفاده از ژن آنزیم سوپراکسید دیسموتاز1 انسانی که در تحقیقات بالینی کاربرد های مفیدی را برای آن ذکر کرده اند، سلول های پایداری که قابلیت تولید این آنزیم را داشته باشند تولید کرد. در این پژوهش سلول های پایدار مذکور تولید شده است که قابلیت استفاده در تحقیقات بالینی بعدی را دارد.

اساتید راهنما و مشاور

محمد تقی طریحی

پایان‌نامه‌های مشابه

اسناد مشابه

  • بررسی آثار قرار گرفتن در معرض امواج تلفن همراه (۹۰۰ مگاهرتز) در اوایل تولد بر حافظه و فعالیت آنزیم سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز در بافت مغز موش صحرایی

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیmohammad reza bigdeli، assistant professor, department of physiology, zanjan branch, islamic azad university, zanjan, iran mehdi rahnama، associated professor, department of physiology, zanjan branch, islamic azad university, zanjan, iran

    هدف: امواج الکترومغناطیسی تلفن همراه از میدان الکترومغناطیسی موجود در آن صادر می‏شود. مطالعات مختلف نشان داده‏ است که روابطی بین امواج الکترومغناطیس و آسیب‏های عصبی و سرطانی وجود دارد. هدف این مطالعه پژوهش در مورد آثار تشعشعات تلفن همراه بر فعالیت آنزیم‏های آنتی اکسیدان مغز بود.

  • تمایز عصبی سلول های استرومایی مغز استخوان موش صحرایی توسط فاکتورهای غیر سمی مادۀ فعال زیستی به عنوان یک القاء کننده

    مقالهمجله علوم اعصاب شفای خاتمپرستو براتی، parastoo barati shefa neuroscience research center, khatam alanbia hospital, tehran, iran.مرکز تحقیقات علوم اعصاب شفا، بیمارستان خاتم الانبیاء، تهران، ایران مرضیه درویشی، marzieh darvishi department of anatomy, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran.گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران تقی طریحی، taghi tiraihi shefa neuroscience research center, khatam alanbia hospital, tehran, iran.مرکز تحقیقات علوم اعصاب شفا، بیمارستان خاتم الانبیاء، تهران، ایران طاهر درودی

    مقدمه: علی‏رغم پیشرفت های فراوان در زمینۀ داروشناسی و تکنیک های جراحی، ضایعۀ نخاعی همچنان به عنوان یک مسئلۀ پیچیده در علم پزشکی باقی مانده است. سلول درمانی یکی از روش های نوین است که برای درمان ضایعات نخاعی به کار می رود. در این مطالعه از مادۀ فعال زیستی tnt (یک مکمل جدید) جهت تب

  • بررسی آثار کامپوزیت ژلاتین– کیتوسان بر کشت سلول های استرومایی مغز استخوان موش صحرایی

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزدافسانه کرمی جویانی، a karami joyani tehranتهران مهدی صابری، m saberi tehranتهران غلامرضا کاکا، gh kaka tehranتهران سید همایون صدرایی

    مقدمه: ژلاتین و کیتوسان به عنوان بیوپلیمرهای زیست سازگار و زیست تخریب پذیر شناخته شده اند. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثرات غشاء ژلاتین- کیتوسان بر روی زنده ماندن، تکثیر، مرگ و تمایز سلول های استرومایی مغز استخوان موش صحرایی می باشد. روش بررسی: در این مطالعه ابتدا فیلم کامپوزیتی ژل

  • نقد مقاله: بررسی آثار قرار گرفتن در معرض امواج تلفن همراه (۹۰۰ مگاهرتز) در اوایل تولد بر حافظه و فعالیت آنزیم سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز در بافت مغز موش صحرایی

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیmajid jadidi، depatment of medical physics, faculty of medicine, semnan university of medical sciences, semnan, iran

    اخیراً مقاله‏ای با عنوان «بررسی آثار قرار گرفتن در معرض امواج تلفن همراه (900 مگاهرتز) در اوایل تولد بر حافظه و فعالیت آنزیم سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز در بافت مغز موش صحرایی» را مطالعه نمودم که در آن فصلنامه پژوهشی [1] به چاپ رسیده بود. همان‏طور که محققین محترم نیز در ابتدای م

  • بررسی ترمیم نقص جزیی استخوان ران توسط سلول های استرومایی مغز استخوان و غشای ژلاتین- کیتوسان در موش صحرایی

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی گیلانآسا اجودانی، a ajoudani مهر انگیز صدوقی، m sadoughi سید همایون صدرایی، s h sadraie neurosciences research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranمرکز تحقیقات علوم اعصاب و گروه علوم تشریح، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران غلامرضا کاکا

    مقدمه: سلول های استرومایی مغز استخوان (bmscs) سلول های بنیادی چند توانی هستند که توان تمایز به سلول های اوستئوژنی را دارند. امروزه از داربست های زیست تخریب پذیر به عنوان روش درمانی جدید برای جایگزینی و بستر بافت از دست رفته استفاده می شود. هدف: بررسی ترمیم نقص جزیی استخوان ران تو

  • تأثیر تزریق سلول های استرومایی مغز استخوان در بهبود اثرات صرع ناشی از تزریق پیلوکارپین در موش صحرایی

    مقالهتوانبخشیعلی رضا عبدانی پور، ali reza abdani-pour department of anatomy, faculty of nursing, tarbiat modares university, tehran, iran.گروه علوم تشریح، دانشکده پرستاری، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. تقی طریحی، taghi tarihi سیدجواد میرنجفی زاده، seyyed javad mirnajafi-zadeh

    هدف: صرع با منشاء لوب گیجگاهی رایج ترین نوع صرع در انسان است و مهمترین مشخصه آن بروز حملات تکرار شونده در بیمار است. با توجه به عوارض ناشی از داروهای ضد صرع و خطرات ناشی از جراحی ها، در این تحقیق تأثیرات ناشی از تزریق سلول های استرومایی مغز استخوان در موش های صحرایی صرعی مدل پیلو