ارزیابی پاسخ میزبان در گربه های آلوده شده با سویه ned توکسوپلاسما گوندئی
چکیده
چکیده توکسوپلاسماگوندئی، یک انگل داخل سلولی است، که قدرت آلوده کردن اکثر مهره داران خونگرم را دارا می باشد. گربه سانان مخصوصاً گربه های اهلی، مهم ترین مخزن این تک یاخته برای انسان و دیگر حیوانات به شمار می روند. توکسوپلاسما گوندئی تنوع ژنتیکی بالایی دارد. روش های تشخیصی متعددی جهت تشخیص این عفونت طراحی شده اند که از بین آن ها، روش الایزای مبتنی بر آنتی ژن خالص شده، به لحاظ سهولت، کمی بودن و امکان بررسی چند نمونه به طور همزمان، از اهمیت ویژه ای برخوردار است. هدف از انجام این مطالعه، بررسی پاسخ سرولوژیک گربه ها به سویه nedتوکسوپلاسما گوندئی و ارزیابی ارزش تشخیصی روش الایزا با استفاده از آنتی ژن sag1 در تشخیص عفونت ناشی از این سویه در گربه های بدون علائم بالینی می باشد. به منظور انجام این بررسی، ابتدا، اقدام به تهیه شش قلاده بچه گربه خانگی در سنین 3-1 ماه گردید. قبل از شروع آزمایش، اقدام به اخذ یک نمونه سرمی از گربه ها و بررسی نمونه های اخذ شده از لحاظ وجود تیتر پادتنی قابل ردیابی با استفاده از تست ایمنوفلورسانس غیرمستقیم با تیتر 1:16 شد. در صورت وجود تیتر قابل ردیابی ضد توکسوپلاسما گوندئی، گربه مربوطه، از مطالعه حذف می شد تا در نهایت تعداد شش قلاده بچه گربه سرم منفی جهت بررسی، آماده شدند. در مرحله بعدی اقدام به انجام واکسیناسیون گربه ها و درمان ضد انگلی گردید. گربه ها در طول بررسی از نظر وجود علائم بالینی مورد ارزیابی قرار گرفتند. از آنجا که بررسی در شرایط تحت بالینی انجام گرفت، تهیه رادیوگراف از قفسه سینه گربه ها انجام شد و از نظر درگیری ریه ها (به عنوان اولین ارگان قابل ارزیابی رادیوگرافیک متعاقب عفونت بالینی) و از نظر وجود علائمی همچون الگوی آلوئولار (alveolar pattern)، آب آوردگی پرده جنب (pleural effusion)، الگوی بینابینی (interstitial pattern) مورد بررسی قرار گرفتند. گربه های مورد ارزیابی در ابتدا، فاقد هر گونه عوارض ریوی قابل تشخیص با رادیولوژی بودند. در مرحله بعدی، اقدام به تزریق تعداد 10000 تکی زوآیت استخراج شده از کشت سلولی vero به تعداد چهار قلاده و فیلتر حاصل از کشت سلول بدون تکی زوآیت به دو قلاده از گربه ها (گروه کنترل) گردید. نمونه های خون از دو روز بعد از تزریق، یک روز در میان اخذ شدند. نمونه های سرمی اخذ شده با تست الایزا مورد ارزیابی قرار گرفتند و نتایج حاصل از این روش با تست پادتن درخشان غیرمستقیم مقایسه گردید. نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که الایزای طراحی شده با استفاده از آنتی ژن خالص شده sag1قابلیت ردیابی عفونت ناشی از توکسوپلاسما گوندئی، سویه nedرا حداقل از روز هشتم پس از بیماری دارا می باشد. حساسیت تست مورد استفاده در مورد این روش، 100% و ویژگی آن 94% بود. بررسی ارزش تشخیصی الایزا با استفاده از روش rocنشان دهنده سطح زیرین منحنی برابر با 969/0 بود که تست مذکور را تستی ارزشمند و دقیق معرفی می کند. نقطه برش اندکس (cut off point) الایزا در حساسیت و ویژگی مذکور برابر 10/. می باشد.