بررسی نقش آنزیم فسفو دی استراز در القاء تکثیر / آپوپتوزو تعیین الگوی بیان ایزوآنزیم های آن در دو رده سلولی سرطان سینه mcf-7 و mda-mb-468
چکیده
فسفو دی استراز ها با هیدرولیز cgmp و camp در تنظیم انتقال پیام سلولی نقش ایفا می کنند. فسفو دی استراز ها به یازده خانواده طبقه بندی می شوند که از بین این خانواده فقط فسفو دی استراز های 5، 6و 9 به طور اختصاصی cgmp را تجزیه می کنند. اخیرا" مهار فسفو دی استراز ها توسط مهار کنند های انتخابی به عنوان یک استراتژی در القاء آپوپتوز در سلول های سرطانی مورد توجه قرار گرفته است. بر این اساس، تحقیق حاضر به منظور بررسی نقش فسفو دی استراز 5، 6 و 9 در القاء تکثیر / آپوپتوز و تعیین الگوی بیان آن ها در دوره سلول سرطان سینه mcf-7 و mda-mb-468 طراحی گردید.نتایج تیمار سلول ها با سیلدنافیل سیترات ( مهارکننده فسفو دی استراز 5)، zaprinast (مهار کننده فسفو دی استراز 6) و bay 73-6691( مهارکننده فسفو دی استراز 9) نشان داد که مهار کننده ها باعث مهار رشد و القاء آپوپتوز در سلول های سرطان سینه می شوند. به منظور بررسی آپوپتوز از تکنیک های فلو سایتومتری ( رنگ آمیزی دو گانه سلول با annexin v-fitc/pi)و رنگ آمیزی سلول با هوخست 33258 استفاده گردید و الگوی آپوپتوزی در سلول ها مشاهده گردید. هم چنین در این تحقیق الگو و تفاوت بیان آنزیم های فسفو دی استراز 5، 6 و 9 توسط تکنیک real-time taqman pcr بررسی گردید. نتایج نشان دادند که سلول های سرطانی mda-mb-468 آنزیم های فسفو دی استراز 5 و 6 را به ترتیب 3و 17برابر بیشتر از سلول های mcf-7 بیان می کنند و فسفو دی استراز 9 در هر دو رده سلول سرطانی به یک میزان بیان می گردد. پژوهش حاضر اولین گزارشی است که بیان می کند مهار فسفو دی استراز های اختصاصی cgmp می تواند باعث القاء آپوپتوز در سلول های سرطان سینه انسانی mcf-7 و mda-mb-468 شود. نتایج مطالعه حاضر پیشنهاد می کند که استفاده از این مهارکننده ها در درمان سرطان سینه شاید مفید باشند.