جداسازی و همسانه سازی ژن لاکتوفرین شتر عربی camelus dromedairus و بیان آن در مخمر pichia pastoris
چکیده
تولید پروتئین و پپتید هایی با خواص ضد میکروبی یکی از زمینه های جذاب در تکنولوژی تولید پروتئین های نوترکیب است. پروتئین لاکتوفرین و پپتید مشتق شده از آن، لاکتوفریسین، علاوه بر خواص ضد میکروبی، خواص دیگری همچون خواص ضد ویروسی، ضد توموری و ضد التهابی را نیز از خود نشان داده اند. ژن لاکتوفرین شتر از بافت پستانی شتر جداسازی و پس از همسانه سازی آن در ناقلptz57r/t، توالی مربوطه تایید و در ناقل بیان phil-s1 همسانه سازی شد. توالی مربوط به لاکتوفریسین شتر نیز با همردیف سازی توالی لاکتوفرین جانوران مختلف و بررسی خواص ضد میکروبی شناسایی، به طور مصنوعی سنتز و در ابتدا در ناقل بیان ppicz? a و سپس در ناقل بیان phil-s1 همسانه سازی شد. ناقل های بیان خطی شده و سپس به روش الکتروپوراسیون به مخمر انتقال داده شدند. بیان پروتئین در مخمر القا شد و بعد از تغلیظ پروتئین، خواص ضد میکروبی بررسی شد. آنالیز داده ها نشان داد که لاکتوفرین و لاکتوفریسین دارای خواص ضد باکتریایی و ضد قارچی هستند.