پایان‌نامه

کلون، بیان، تخلیص و بررسی آنتی ژنیسیته نواحی آنتی ژنیک پروتئین vaca هلیکوباکتر پیلوری

چکیده

زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری شایع ترین باکتری است که جوامع انسانی را در بعد جهانی مبتلا به عفونت ساخته است. ژن vaca از مهمترین شاخص های بیماری زایی این باکتری می باشد که باعث تشکیل واکوئل های اسیدی در سیتوپلاسم سلول و تخریب سلول های اپیتلیال معده می شود. هدف از این مطالعه بیان بالا و بررسی خواص آنتی ژنیک پروتئین نوترکیب vaca هلیکوباکتر پیلوری در سرم انسان و موش آلوده با هدف طراحی واکسن علیه هلیکوباکتر پیلوری در آینده است. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، قطعه حاوی ناحیه دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک ژن vaca به طول 1233 جفت باز براساس برنامه های بیوانفورماتیکی بدست آمد، پس از تکثیر ناحیه مورد نظر با استفاده از روش pcr، در ناقل پلاسمیدی pet32a کلون و بیان شد. پس از خالص سازی پروتئین نوترکیب، آنتی ژنیسیته آن به روش وسترن بلات با سرم افراد آلوده به عفونت فعال هلیکوباکتر پیلوری و سرم موش های تلقیح شده با پروتئین نوترکیب خالص شده بررسی شد. یافته ها: نتایج pcr و تعیین توالی نشان داد که ژن هدف به درستی در ناقل مورد نظر کلون شده است. بیان پروتئین با استفاده از iptg القا شد. پروتئین بیان شده به وسیله کیت ni-ntaتخلیص و سپس دیالیز گردید و با آنتی بادی های استفاده شده در وسترن بلات واکنش داد. پروتئین نوترکیب با وزن ملکولی 65 کیلو دالتون و غلظت mg/ml1/2 بدست آمد. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب vaca دارای خاصیت آنتی ژنیک و ایمنوژنیک می باشد. بنابراین می توان از آن به عنوان کاندید مناسبی برای طراحی کیت های تشخیصی و واکسن هلیکوباکتر پیلوری استفاده نمود.

اساتید راهنما و مشاور

حمید ابطحی

پایان‌نامه‌های مشابه

اسناد مشابه

  • کلون، بیان، تخلیص و بررسی آنتی‌ژنیسیته نواحی آنتی‌ژنیک پروتئین MOMP کلامیدیا تراکوماتیس

    هدف: کلامیدیا تراکوماتیس انگل داخل سلولی اجباری، گرم منفی و یکی از شایع‌ترین عوامل عفونت‌های جنسی می‌باشد. پروتئین MOMP بیش از 60% پروتئین‌های خارج غشایی را شامل می‌باشد که نشان‌دهنده اهمیت این پروتئین برای شناسایی باکتری کلامیدیا تراکوماتیس می‌باشد. هدف از مطالعه، تولید پروتئین

  • تولید ناحیه آنتی ژنیک vaca هلیکوباکتر پیلوری در اشریشیاکلی

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکلیلا حسن زاده، leila hasanzadeh department of biotechnology and microbiology, arak university of medical sciences, arak, iranگروه بیوتکنولوژی و میکروبیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران حمید ابطحی، hamid abtahi department of microbiology, molecular and medical research center, arak university of medical sciences, arak, iranمرکز تحقیقات پزشکی و ملکولی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences) احسان الله غزنوی راد، ehsanollah ghaznavi-rad department of microbiology, arak university of medical sciences, arak, iranگروه میکروب شناسی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences) صفیه صوفیان

    زمینه و هدف: هلیکوباکترپیلوری شایع‎ترین باکتری است که جوامع انسانی را در بعد جهانی مبتلا به عفونت ساخته است. ژن vaca از مهم‎ترین شاخص‎های بیماری زایی این باکتری می‎باشد که باعث تشکیل واکوئل‎های اسیدی در سیتوپلاسم سلول و نیز تخریب سلول‎های اپیتلیال می‎شود. هدف از این مطالعه بررسی

  • تخلیص و بررسی ویژگی های آنتی ژنیک پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار بیان شده در باکتری Escherichia coli

    چکیده تخلیص انواع پروتئینهای بیان شدهی ویروسی با اهداف مختلف از جمله تولید آنتیبادیهای چند همسانهای و تک همسانهای، مطالعهی ساختاری آنها، شناسایی توالی آمینو اسیدی و توالی پپتیدی با استفاده از انواع روشهای کروماتوگرافی، صورت میپذیرد که عموماً کاربرد چنین روشهایی مستلزم صرف هزینهی