پایان‌نامه

بررسی آلودگی کشت های سلول vero,rk-13و mrc5 به سلول های سرطانی hela با انگشت نگاری dna با استفاده از آنالیز تکراری کوتاه(str)

بهزاد رمضانی

چکیده

خلاصه: استفاده از کشتهای سلولی یکی از ابزارهای مهم پژوهشهای زیستی می باشد. آلودگی کشت های سلولی با سلولهای hela به عنوان خطری بالقوه برای تحقیقات سلولی و نتایج حاصل از آن محسوب می شود. در این تحقیق از آنالیز توالی های تکراری کوتاه (str) برای تشخیص آلودگی های سلولی به hela استفاده شده است. مواد و روش ها: برای تشخیص آلودگی سلولهایrk-13 ، vero و mrc-5 به سلول های hela، از تعداد سیزده str؛ مبتنی بر سیستم combined dna index system (codis) همراه با ژن آمیلوژنین (برای تشخیص جنسیت سلول ها) استفاده شد. برای تکثیر strها از pcr استفاده گردید، برای مشاهده اندازه هر کدام از strها الکتروفورز با ژل پلی اکریل آمید (page) بکار گرفته شد. در نهایت با رنگ آمیزی ژل با نیترات نقره و تجزیه و تحلیل باند های بدست آمده، بوسیله نرم افزار labworks، کدهای عددی هر کدام ازstrها با کدهای عددی strهای موجود در دو مرجع (atcc) و (jcrb) (برای تعیین آلل معرف نوع سلول) مقایسه شدند. یافته ها و نتیجه گیری: نتایج بدست آمده نشان داد که سلول های مورد مطالعه، فاقد آلودگی به hela می باشند. آلودگی عمدی سلولها با سلولهای hela به میزان 10% برای mrc-5 و 5% برای vero و 2% برای rk-13 با این روش تشخیص داده شد که می تواند به عنوان معیاری برای حساسیت روش استفاده از آنالیز توالی های تکراری کوتاه (str) بکار رود

اساتید راهنما و مشاور

علی میرجلیلی

اسناد مشابه

  • بررسی اثرات سایتوتوکسیک محیط کشت حاصل از سلول های اپی تلیال آمنیونی بر سلول های سرطانی hela و سلول های سرطان پستان mda-mb-۲۳۱

    مقالهphysiology and pharmacologyحسن نیک نژاد، hassan niknejad nanomedicine and tissue engineering research center, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran مهسا خیاط خویی، mahsa khayat-khoei nanomedicine and tissue engineering research center, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran قاسم یزدان پناه، ghasem yazdanpanah nanomedicine and tissue engineering research center, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran حبیب الله پیروی

    مقدمه: پرده ی آمنیون، داخلی ترین لایه خارج جنینی، دارای دو نوع سلول شامل سلول های مزانشیمی و اپی تلیالی می باشد. توانایی سلول های مزانشیمی پررده آمن یر ون در مهار سرطان گزارش شده است. در این مطالعه تأثیر سلول های اپی تلیال آمنیوتیک بر روی زیست پذیری سلول های سرطانی و نقش آپوپتروز