ارزیابی اثرات مهاری فراکشن های درون سلولی پروبیوتیک لاکتوباسیلوس کازئی و لاکتوباسیلوس پاراکازئی در رده سرطانی لوکمیای میلوئیدی مزمن به صورت آزمایشگاهی
چکیده
چکیده : لاکتوباسیلوس¬ها رایج ترین میکروارگانیسم¬های مورد استفاده به عنوان پروبیوتیک می¬باشند. خواص ضدتوموری این دسته از باکتری¬ها در مطالعات گوناگون به اثبات رسیده است، این خواص احتمالا به دلیل وجود ویژگی تنظیم کننده سیستم ایمنی مربوط به این باکتری¬ها می¬باشد. هدف این مطالعه بررسی تاثیر فراکشن¬های پروتئینی بدست آمده از عصاره و دیواره سلولی پروبیوتیک- های لاکتوباسیلوس پاراکازئی و ل. کازئی بر مهار رشد رده سلول¬های سرطانی k562 در شرایط آزمایشگاهی بود. روش بررسی: ابتدا باکتری¬ها در محیط کشت اختصاصی و در شرایط بی¬هوازی کشت و پس از شستشو با محلول بافری فسفات (pbs) به کمک دستگاه سونیکاتور شکسته شده و جهت جدا کردن دیواره سلولی از عصاره سلولی سانتریفیوژ شدند .سپس برای رسوب پروتئین¬های دیواره و عصاره از اسید تری کلرو استیک 72 درصد و دی اگزالات سدیم 15 درصد استفاده شد. پروتئین های استخراج شده در حضور مارکر تعیین کننده وزن پروتئین تحت جریان الکتریسیته در ولتاژ ثابت به مدت زمان حدود 3 ساعت حرکت نموده و پس از پایان الکتروفورز ژل و پروتئین های موجود با رنگ نیترات نقره رنگ آمیزی شد و تنها رنگ مربوطه در نواحی باندهای پروتئین ظاهر شد و پس از شناسایی وزن مولکولی پروتئین ها موجود در آن¬ها با استفاده از ستون سفادکس g-150 فرکشن بندی شد. و سپس فراکشن¬های بدست آمده جهت بررسی بر یاخته¬های سرطانی مورد استفاده قرار گرفت. سپس غلظت¬های 500، 1000، 2000، 3000 و 4000 میکروگرم در میلی لیتر از رسوب پروتئین دیواره سلولی باکتری¬ها و غلظت¬های 500، 1000، 2000 و 3000 میکروگرم در میلی¬لیتر از رسوب پروتئین عصاره سلولی به طور جداگانه در محیط کشت سلولی تهیه و خواص سلول کشی آن¬ها علیه رده سرطانی k562 در شرایط آزمایشگاهی در زمان¬های 12، 24، 48 و 72 ساعت و با تراکم 10000 سلول در چاهک به روش رنگ سنجی mtt سنجیده شد. یافته¬¬ها: نتایج نشان داد که فراکشن¬های پروتئینی با وزن مولکولی بالا و وزن مولکولی پایین دیواره سلولی هر دو پروبیوتیک قادرند به طور معنی داری (046/0=p) رشد رده سرطانی k562 را مهار سازد. همچنین فعالیت سلول کشی فراکشن¬های پروتئینی عصاره در هر دو پروبیوتیک ل. پاراکازئی و ل. کازئی وابسته به غلظت می¬باشد و گذشت زمان تاثیر کمتری در فعالیت سلول کشی آنها داشت. نتیجه گیری: بر اساس یافته¬های حاصل می¬توان نتیجه گرفت که استفاده از فراکشن¬های پروتئینی دیواره و عصاره با وزن مولکولی بالا در هر دو پروبیوتیک ل. پاراکازئی و ل. کازئی نسبت به فراکشن¬های پروتئین با وزن مولکولی پایین دارای اثرات ضدسرطانی بیشتری می¬باشد. همچنین فراکشن¬های پروتئینی دیواره سلولی و عصاره سلولی پروبیوتیک ل. پاراکازئی نسبت به ل. کازئی دارای درصد سلول کشی بیشتری می¬باشد
