ارائه پروتکل منتخب الکتروکموتراپی با شدت پایین (150-50 ولت برسانتی متر)و فرکانس بالا (6- 4کیلوهرتز) برمبنای مطالعه نفوذپذیری و بقا بر سلول های تومورالk562 ، mcf-7 وpancreatic و سلول های اندوتلیال بندناف: مقایسه با محیط in vivo در موش تومورال balb/c
چکیده
الکتروپوریشن روشی نوین همراه با افزایش نفوذپذیری سلول ها است که با انتخاب مناسب پارامترهای الکتریکی می توان سلول-ها را نسبت به ماکرومولکول ها، یون ها و ... نفوذپذیر کرد. اگر الکتروپوریشن را با تزریق داروهای شیمی درمانی همراه کنیم، به روش نوین الکتروکموتراپی در درمان تومورها دست خواهیم یافت. الکتروکموتراپی با پروتکل کلینیکی- تجاری، 8 پالس با شدت میدان 1300 ولت برسانتی متر، فرکانس 1 هرتز و عرض پالس100 میکروثانیه، امروزه به عنوان روشی نوین در درمان تومورهای سطحی و جامد وارد فاز کلینیکی خود شده است. این روش مانند هر روش درمانی نوین دارای کاستی هایی است. الکتروکموتراپی درکنار نتایج خوبی که به همراه داشته است باعث ایجاد درد در بیماران تحت درمان می شود. در ضمن ایجاد تاول و سوختگی به عنوان دومین مشکل این روش به شمار می رود. برمبنای تحقیقات صورت گرفته و به منظور رفع برخی از مشکلات این روش تجاری، اخیرا به میدان های الکتریکی با فرکانس های بالا و شدت های پایین توجه شده است. مواد و روش ها: با توجه به اینکه در تحقیقات گذشته مطالعه کاملی برروی شدت میدان های پایین (50 الی 150 ولت برسانتی متر) و فرکانس بالا صورت نگرفته است و میزان اثرگذاری بر بقا و افزایش نفوذپذیری این روش شناخته نشده، در این رساله اثر شدت میدان های بین 50 الی 150 ولت برسانتی متر را در سه فرکانس 4، 5 و 6 کیلوهرتز در شرایط in vitro را مورد بررسی قراردادیم، تا بتوانیم پروتکل موثر را در شرایط in vivo بر مبنای شناخت اثر الکتروپوریشن بر بقا و نفوذپذیری در شدت میدان های پایین و فرکانس بالا در محیط in vitro معرفی کنیم. بدین منظور و جهت برآورده کردن دو اصل الکتروکموتراپی (تعامل بین بقا و افزایش نفوذپذیری) در بخش سلولی، بقا را به روش mtt و نفوذپذیری را با استفاده از داروی شیمی درمانی بلومایسین در سه رده سلول های تومورالk562 (سلول های حساس به درمان) mcf-7 (نیمه مقاوم) وpancreatic (سلول های مقاوم به درمان) و همچنین سلول های اندوتلیال بندناف، بررسی شدند. با انتخاب 3 پرتکل از 33 روش فوق به عنوان پروتکل نامزد در بخش سلولی آزمایشات را در بخش دوم تحقیق بر روی کاهش حجم، آپوپتوز در تومور آدنوکارسینومای پستان موش balb/c انجام دادیم. نتایج: برمبنای نتایج به دست آمده در بخش سلولی چهار پرتکل زیر به عنوان پرتکل بهینه معرفی شدند. 1-شدت میدان 60 ولت برسانتی متر با فرکانس 5 کیلوهرتز، 2- شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 4 کیلو هرتز، 3- شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 5 کیلو هرتز و 4- شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 6 کیلو هرتز. نتایج نشان دادند الکتروکموتراپی با شدت میدان 70 ولت برسانتی متر توانایی کاهش حجم تومور، افزایش آپوپتوز و کاهش درجه تومور را دارا می باشند و در این میان گروه الکتروکموتراپی با شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 5 کیلو هرتز مناسب ترین گزینه درمان در درمان تومور پستان موش balb/c است.