بررسی برهمکنش تعدادی از کمپلکس های فلزی کورکومین با آنزیم لیزوزیم سفیده تخم مرغ و اثر آن ها بر فعالیت کاتالیتیکی آنزیم
چکیده
در این تحقیق برهمکنش سه ترکیب فلزی کورکومین به نام¬های گالیم¬کورکومین، وانادیل¬کورکومین و ایندیم¬کورکومین با پروتئین مدل لیزوزیم سفیدهی تخم مرغ مورد مطالعه قرار گرفته است. لیزوزیم نقش¬های دارویی و فیزیولوژیکی بسیاری در بدن ایفا می¬کند بنابراین به عنوان یک پروتئین مدل می¬تواند استفاده شود. کورکومین هم اصلی¬ترین ماده موجود در زردچوبه است که موجب رنگ زرد این ترکیب می¬شود. در این تحقیق برهمکنش لیگاندهای یاد شده با پروتئین لیزوزیم سفیدهی تخممرغ با استفاده از فلورسانس حالت پایا، فلورسانس سینکرونس، طیفسنجی دورنگنمایی دورانی، آشکارسازی فیبریلهای آمیلوئید، انتقال انرژی از پروتئین به لیگاند، جذب¬سنجی و طیفسنجی مرئی-فرابنفش انجام شد. نتایج آزمایشهای تیتراسیون فلورسانس نشان داد که برهمکنش هر یک از سه لیگاند مذکور با لیزوزیم با تشکیل کمپلکس غیر فلورسنت بین لیگاند و پروتئین با استوکیومتری 1:1 همراه است. مقادیر ثابت استرن-ولمر (ksv)، ثابت خاموشی دومولکولی (kq) و ثابت پیوندی (ka) از آنالیز دادههای فلورسانس به دست آمد. بررسی انتقال انرژی از لیزوزیم به هر یک از لیگاندهای مذکور نشان داد که این سه لیگاند در نزدیکی تریپتوفان 62 در جایگاه پیوندی به فواصل 5/2 تا 5/4 نانومتر قرار گرفتهاند. در بررسی طیفهای سینکرونس مشاهده شد که لیگاندهای موردنظر در فرایند برهمکنش با لیزوزیم قطبیت محیط اطراف دنباله¬های تیروزین و تریپتوفان را تغییر نمیدهند. در بررسی نتایج آمیلوئیدی مشخص شد که افزایش غلظت هر سه لیگاند باعث کاهش تجمع آمیلوئیدی لیزوزیم شده است. بر اساس نتایج محاسبات دمایی کمپلکس نهایی بین این سه لیگاند و پروتئین لیزوزیم با استفاده از برهم¬کنش¬های هیدروژنی پایدار می¬شود منفی¬تر بودن تغییرات آنتالپی اتصال وانادیل¬کورکومین-لیزوزیم و ایندیم¬کورکومین-لیزوزیم نسبت به آنتالپی اتصال گالیم¬کورکومین-لیزوزیم نشان¬دهنده قوی¬تر بودن پیوند وانادیل¬کورکومین-لیزوزیم و ایندیم¬کورکومین-لیزوزیم است که در هماهنگی کامل با ثابت ظاهری پیوندی است.