بررسی هاپلوگروپهای d-loop میتوکندری بیماران آزواسپرمی در نمونه های ایرانی
چکیده
سلول اسپرم به منظور عملکرد صحیح خود نیاز به atp دارد، که این مولکول توسط میتوکندری تامین می شود. وجود جهش های نقطه ای و یا حذف هایی در ناحیه d-loopمیتوکندری، روی عملکرد زنجیر انتقال الکترون اثر خواهد گذاشت و در نتیجه موجب نقص عملکردی اسپرم می شود. در این تحقیق به بررسی وجود ارتباط بین پلی مورفیسم های دو ناحیه hv1 و hv2 در d-loop میتوکندری و بیماری آزواسپرمی پرداخته شد. از مجموع 360 نمونه خون که شامل 24 نمونه آزو اسپرمی و 336 نمونه کنترل از اقوام مختلف ایرانی بود، استخراج dna به روش salting-out انجام شد. سپس با استفاده از جفت پرایمرهای اختصاصی طراحی شده onp98f-onp77r و onp38f-onp79r به ترتیب نواحی hv1 و hv2ی d-loop میتوکندری در واکنشpcr تکثیر شدند. توالی یابی مستقیم محصول pcr به منظور تعیین پلی مورفیسم این ناحیه نیز صورت گرفت. نتایج این تحقیق 85 پلی مورفیسم را نشان داد که پلی مورفیسم نقطه ای a16129 gو c16172 t در ناحیه hv1 افراد بیمار تفاوت معنی داری را با گروه کنترل نشان داد. اما پلی مورفیسم های مشاهده شده در ناحیه hv2، ارتباط معنی داری را در بیماران آزواسپرمی با کنترل نشان نداد. براساس نتیجه این پژوهش، پلی مورفیسم های a16129g و c16172 t می توانند به عنوان مارکرهایی برای تشخیص بیماری، در بیماران آزواسپرمی جمعیت های ایرانی باشد. بر اساس مشاهدات به دست آمده، تفاوت معنی داری بین پلی مورفیسم g16129a و t16519c در افراد بیمار و گروه کنترل قومیت یزد وجود داشت. با مقایسه پلی مورفیسم نقطه a16129 gبا هر یک از اقوام به تنهایی تفاوت معنی داری بین این پلی مورفیسم با گروه کنترل ارمنی، آشوری، یهود، کرد و کرمان دیده شد. این تفاوت معنی دار بین گروهای آشوری، بلوچ، آذری، اصفهان و یهود و پلی مورفیسم نقطه c16172 tنیز دیده شد.