بهینه سازی تخلیص پروتئین انتقال دهنده لیپید (ltp) و ساخت ستون تمایلی جهت تخلیص آن
چکیده
پروتئین های غیر اختصاصی انتقال دهنده لیپید (nsltps) در گیاهان، پروتئین های بازی کوچکی هستند که فسفولیپیدها را بین غشاءها جابه جا می کنند و به دو زیرخانواده ( kda 9) ltp1 و ( kda 7) ltp2 تقسیم می شوند. به منظور تخلیص ltp1، ابتدا آرد برنج شلتوک دار عصاره گیری شد. پروتئین های عصاره توسط آمونیم سولفات رسوب داده شد. اکتینیدین اضافه و از ستون کربوکسی متیل- سفارز عبور داده شد. جهت تحریک سیستم ایمنی خرگوش و تولید آنتی بادی پلی کلونال برای ساخت ستون کروماتوگرافی تمایلی ضد ltp1، این پروتئین با استفاده از دو روش کنژوگه شد: 1) کنژوگه کردن با گلوتارآلدهید و 2) کنژوگه کردن با پراکسیداز. پروتئین های کنژوگه شده به خرگوش ها تزریق شد. از anti-ltp1 igg های تخلیص شده ستون تمایلی ساخته و جهت تخلیص ltp1 از آن استفاده شد.