بیان ژن hsp70 در هیبریدهای کرم ابریشم تجارتی در پاسخ به شوک گرمایی
چکیده
زمانی که موجودات زنده در معرض یکسری عوامل استرس¬زا از جمله سرما و گرما، عوامل سمی مانند فلزات سنگین قرار می-گیرند پروتئین¬های شوک حرارتی (hsp :heat shock protein) را تولید می¬کنند. در این پژوهش بیان ژن hsp70 در بافت چربی کرم ابریشم در پاسخ به شوک حرارتی (45 درجه سانتی¬گراد به مدت 35 دقیقه) در چهار هیبرید اندازه گیری و با تحمل گرمایی لاروها مقایسه شد. نمونه گیری¬ها از هیبریدهای 103×104، 104×103، 107×110 و 110×107 در روز چهارم سن پنجم در زمان¬های صفر، دو، چهار و بیست¬و¬چهار پس از شوک حرارتی انجام شد. rna کل نمونه های شوک دیده و شاهد پس از استخراج به cdna تبدیل شدند. بیان ژن hsp70 در برابر ژن rpl27aکرم ابریشم با استفاده از real-time pcr و فرمول ??ct- 2 اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که بیان hsp70 در کرم ابریشم تحت تاثیر شوک حرارتی افزایشی بوده است. دو هیبرید 104×103 و 110×107 با پایه¬ی مادری ژاپنی بیان بیشتری نسبت به دو هیبرید 107×110 و 103×104 با پایه¬ی مادری چینی دارند. بعلاوه میزان بیان در این دو هیبرید بالافاصله پس از اعمال شوک حرارتی بسیار زیاد بوده و این نیاز بیشتر لاروهای کرم ابریشم هیبریدهای حساس به hsp70 را در زمان صفر پس از شوک دهی نشان می¬دهد. آنالیز آماری نشان داد که در زمان¬های صفر و دو پس از شوک حرارتی تفاوت معنی¬داری در قیاس با زمان¬های چهار و بیست¬و¬چهار وجود دارد (0/0001 p<). به منظور بررسی تحمل حرارتی لاروها، از شوک حراتی طولانی مدت (8 ساعت در دمای 39 درجه سانتیگراد) استفاده شد. بررسی درصد تلفات لاروی چهار هیبرید مذکور نشان داد که هیبرید 104×103 بیشترین درصد تلفات و هیبرید 107×110 دارای کمترین درصد تلفات می¬باشد.