القای آپوپتوز وابسته به p۵۳ در رده ی سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد پیش ساز لنفوسیت b (nalm-۶) توسط مولکول کوچک rita
چکیده
زمینه و هدف: استفاده از مولکول های غیر پپتید ی با وزن مولکولی پایین که واکنش بینp53 و تنظیم کننده منفی اش یعنی mdm2 را تخریب می کنند، یک راهکار درمانی جدید جهت درمان انواع مختلف سرطان هاست. یکی از این ترکیبات بنام rita (reactivation of p53 and induction of tumor cell apoptosis)به پروتئین p53 متصل شده و با مهار تشکیل کمپلکس p53- mdm2 موجب افزایش سطح p53 و در نتیجه القای آپوپتوز در سلول های سرطانی می گردد. هدف از این مطالعه بررسی اثر rita بر میزان القای آپوپتوز در سلول های nalm-6 می باشد. روش بررسی: سلول های nalm-6 با غلظت های مختلف rita در فواصل زمانی معین تیمار شدند. میزان بقای سلولی و آپوپتوز به ترتیب با استفاده ازروش mtt و رنگ آمیزی پروپیدیوم ایدید ارزیابی شدند. از تکنیک وسترن بلات جهت بررسی سطح پروتئین های p53 و p53 استیله، پروکاسپاز-3 و parp فعال استفاده شد. در نهایت داده ها توسط آزمون تی زوجی آنالیز شدند. یافته ها: rita دارای اثر سیتوتوکسیک بر سلول های nalm-6 است. بررسی فلوسایتومتری حاکی از افزایش معنادار (05/0>p) درصد جمعیت سلول های آپوپتوتیک در ناحیه sub-g1 در سلول های تیمار شده با rita در مقایسه با سلول های کنترل بود. نتایج وسترن بلات نشان دهنده افزایش القای تجمع و استیلاسیون p53 در سلول های nalm-6 توسط rita بود. همچنین rita باعث آپوپتوز بواسطه افزایش فعالیت کاسپازها در سلول های nalm-6 گردید. نتیجه گیری: rita باعث القای آپوپتوز وابسته به p53 در سلول های لوسمی لنفوبلاستیک حاد پیش ساز لنفوسیت b( nalm-6) می شود.