غنی سازی کتابخانه نمایش فاژی علیه سلول های سرطانی سینه به منظور تولید آنتی بادی های تک دومینی شتری شناساگر فاکتور رشد اپیدرمالی ۲
چکیده
چکید ه سابقه و هدف ریزش مارکرهای سرطانی مانند her2 از سطح سلول های سرطانی سینه، باعث مخفی ماندن آن ها از دید سلول های ایمنی می گردد. افزایش غلظت her2 محلول( sher2 )، در نتیجه درمان سرطان سینه her2+ و پاسخ به تراستوزومب، تاثیرگذار است. در همین راستا، آنتی بادی های تک دومینی شتری( vhh ) به علت خصوصیات منحصر به فرد و توانایی بالا در شناسایی آنتی ژن، مواد هدفمند بسیار مؤثری در شناسایی sher2 محسوب می گردند. مواد و روش ها در یک مطالعه تجربی، کتابخانه فاژی به دست آمده از دو شتر ایمن با انجام panning بر روی سلول های سرطانی فاقد her2 و بیان کننده her2 ، علیه آنتی ژن her2 غنی گردید. میزان افینیتی چهار vhh به دست آمده به her2 ، شناسایی sher2 و اتصال به her2 بر روی سلول های سرطانی سینه توسط vhh ها با الایزا مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها بعد از انجام panning بر روی سلول و الایزا، چهار vhh با اتصال قابل ملاحظه به her2 در مقایسه با کنترل منفی شناسایی شدند. vhh های با افینیتی 1- m 1013-1012، توانایی بالایی نیز در شناسایی sher2 (2 میکروگرم در میلی لیتر) نشان دادند. در اتصال به her2 در سطح سلول، آنتی بادی های( vhh ) 4 rr و 6 rr بالاترین میزان اتصال(به ترتیب 33/0 ± 2 و 15/0 ± 5/2) به سلول skbr3 (بیان کننده her2 ) را در مقایسه با سلول فاقد her2 (به ترتیب 17/0 ± 38/0 و 12/0 ± 4/0) نشان دادند. نتیجه گیری استفاده از vhh های اختصاصی her2 برای سنجش sher2 به عنوان بیومارکر، ارزیابی مناسبی از وضعیت her2 در تومور اولیه و متعاقباً پاسخ به درمان می دهد.