مقاله

ارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی origami وbl۲۱

سید حمید رضا خاتمی، hamid reza khatami department of bioscience and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iran.ژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران رامین فلاح زاده، ramin fallah zadeh department of bioscience and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iran.ژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران جلیل فلاح مهرآبادی، jalil fallah mehrabadi department of bioscience and biotechnology, malek ashtar university, tehran, iran.ژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران محمد داود غفاری، mohammad d ghafari young researchers and elites club , north tehran branch, islamic azad university, tehran, iranدانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال، باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، تهران، ایران

چکیده

سابقه و هدف: فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (g-csf) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوئیتیک می تواند سلول های بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان های سرکوبگر میلوئید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلوئید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان g-csf نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است. مواد و روش ها: ژن g-csfانسانی با تغییر کدون های آن به صورت بهینه شده برای بیان در سیستم پروکاریوتی، در وکتور pgem سنتز شده و در وکتور بیانی pet23a همسانه سازی شد. سپس وکتور pet/g-csf در دو سویه بیانی از اشریشیاکلی به نام origami و bl21، ترانسفرم شد و بیان آن در این دو میزبان مقایسه گردید. یافته ها: نتایج هضم آنزیمی، صحت مراحل کلونینگ را در وکتور pet23a نشان داد. همچنین تحت شرایط یکسان و بعد از القای میزبان ها با iptg، بیشترین بیان پروتئین rhg-csf در سویه origami e. coli مشاهده گردید. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که سویه e. coli origami سویه مناسبی جهت بیان g-csf انسانی می باشد و این سویه می تواند به عنوان یک میزبان مناسب جهت بیان این پروتئین در مقیاس بالاتر پیشنهاد گردد.

اسناد مشابه