اثرات انجماد شیشه ای بر میزان آپوپتوز در بلاستوسیست موش
چکیده
مقدمه: در سال های اخیر، پیشرفت های زیادی در انجماد شیشه ای (vitrification) برای نگهداری جنین صورت گرفته است؛ ولی تاکنون، روش قابل اعتمادی در انجماد شیشه ای که بتواند میزان بالایی از زنده ماندن جنین را نشان دهد، ارائه نشده است. زیرا مکانیسم آسیب های جنین به دنبال انجماد شیشه ای به طور دقیق مشخص نشده است. مطالعه حاضر به منظور بررسی تاثیر انجماد شیشه ای بر روی میزان آپوپتوز در جنین در مرحله بلاستوسیست صورت گرفته است. مواد و روشها: بدین منظور 95 عدد بلاستوسیست موش از نژاد swiss albino به طریق فلاش کردن شاخ رحم به دست آمد و به طور تصادفی به دو گروه تجربی(43) و کنترل(52) تقسیم شدند. در گروه کنترل بلاستوسیست ها پس از دریافت در محیط m16 به مدت دوساعت کشت داده شدند و ایندکس آپوپتوز در آنها پس از نشانه گزاری با تکنیک tunel و رنگ آمیزی زمینه ای با pi مشخص شد. در گروه تجربی بلاستوسیست ها پس از دریافت بلافاصله به طریق انجماد شیشه ای با محلول efs40 منجمد شدند و در تانک حاوی نیتروژن مایع به مدت یک ماه نگهداری شدند پس از طی مدت مذکور نی های حاوی بلاستوسیستها ذوب گردیدند و پس از 2 ساعت کشت در محیط m16 میزان ایندکس آپوپتوز در این گروه پس از رنگ آمیزی با تکنیک tunel مشخص گردید. نتایج: مقایسه نتایج نشان داد که میانگین تعداد بلاستومرها در بلاستوسیست های گروه منجمد شده موش(47/2±91/44) نسبت به گروه کنترل (9/2±23/50)، اختلاف معنی داری ندارد(176/0p= ). در حالیکه میانگین تعداد بلاستومرهای آپوپتوتیک در بلاستوسیت های گروه منجمد شده موش (28/008/4) نسبت به گره کنترل (22/093/4) اختلاف معنی داری را نشان داد(02/0=p) و میانگین میزان ایندکس آپوپتوز بر حسب درصد در گروه فریز شده (63/087/11) به طور معنی داری نسبت به گروه کنترل (67/012/9) بیشتر بود(004/0=p). نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که انجماد شیشه ای باعث افزایش میزان آپوپتوز در بلاستومرهای بلاستوسیست موش می شود.