مقایسه بقا و تکوین فولیکول های پره آنترال جدا شده از تخمدان انجماد شیشه ای شده موش سوری با تخمدان تازه در محیط کشت
چکیده
سابقه و هدف: یکی از روش های نگهداری بافت تخمدانی به منظور حفظ قدرت باروری، انجماد شیشه ای است که روشی ساده و فوق سریع است. هدف از انجام این تحقیق ارزیابی رشد و بقای فولیکول های پره آنترال جدا شده از تخمدان انجماد شیشه ای شده موش سوری در محیط کشت و مقایسه آن با تخمدان تازه بود. مواد و روش ها: این تحقیق به روش تجربی بر روی 20 موش مادهی سوری 14روزه، نژاد nmri انجام شد. یک تخمدان به روش انجماد شیشه ای با استفاده از ضد یخ اتیلن گلیکول، فایکول و ساکارز ( egfs40 )، منجمد و پس از یک هفته نگهداری در نیتروژن مایع، با روش سریع و با به کارگیری غلظت های نزولی ساکارز ذوب و شستشو شد. تخمدان دیگر به عنوان گروه شاهد تازه در نظر گرفته شد. فولیکول های پره آنترال با قطر 130-100 میکرون به روش مکانیکی از گروه تخمدان انجمادی و همچنین گروه شاهد تازه جدا و سپس به مدت 10 روز کشت داده شدند. محیط مورد استفاده α-mem حاوی 5% fbs ، miu/ml 100 rfsh ، its یک درصد، ng/ml 20 mregf و آنتی بیوتیک پنی سیلین iu/ml 100 و استرپتومایسین µg/ml 100 بود. قطر فولیکول ها با آزمون t و میزان بقا و تشکیل حفرهی آنتروم با آزمون c 2 مورد مقایسه قرار گرفتند. نتایج: فولیکول های پره آنترال جدا شده از تخمدان منجمد ـ ذوب شده مشابه گروه تازه در محیط کشت زنده مانده و رشد کردند. میزان بقای فولیکول ها در روز ششم کشت در گروه انجمادی 1/72% و در گروه تازه 6/78% بود. در روز دهم کشت این اعداد به ترتیب 9/66% و 6/72% بود. تشکیل حفرهی آنتروم در فولیکول های زندهی گروه انجمادی و گروه تازه 6/37% و 5/43% در روز دهم کشت مشاهده شد. میانگین قطر فولیکول ها در گروه تازه و گروه انجمادی در روز دوم کشت به ترتیب 23/11 ± 11/158 و35/8 ± 48/155 و در روز چهارم کشت 87/9 ± 56/201 و 46/8 ± 42/193 بود. بین دو گروه در هیچ کدام از متغیرهای مورد بررسی، اختلاف معنی داری مشاهده نشد. نتیجه گیری: نتایج تحقیق نشان داد که فولیکول های پره آنترال جدا شده از تخمدان انجماد شیشه ای شده می توانند مشابه تخمدان تازه در محیط کشت زنده باقی مانده، رشد کرده و تشکیل حفره آنتروم دهند.